刘金
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 高营养状态对肿瘤细胞形态和成瘤性的影响被引量：3
- 2016年
- 目的营养状态在癌症治疗中的作用一直受到广泛关注。该文旨在研究高营养状态对肿瘤细胞的影响。方法在肿瘤细胞的培养体系中添加不同浓度的胎牛血清(FBS,5%、10%、25%、50%),以模拟不同的营养状态。培养3周后,CCK-8法测定细胞增殖;克隆形成和体内成瘤实验评价肿瘤细胞成瘤性;最后通过油红染色、流式细胞术、电镜和蛋白质印迹检测探讨可能的机制。结果高血清浓度能促进人乳腺癌细胞系SKBR3细胞和人前列腺癌细胞系PC3M细胞的增殖,但会引起细胞空泡化,并抑制其克隆形成和成瘤能力。诱导后的PC3M细胞,自噬过程特征蛋白轻链3(LC3)Ⅱ/Ⅰ比例上调,电镜中观察到自噬小体增多,表明高浓度的血清可能通过激活自噬来抑制肿瘤细胞的成瘤性。结论高营养状态对肿瘤细胞成瘤性有明显抑制作用,有望成为新的癌症治疗策略。
- 陈思宇刘金秦亚茹葛志强段海峰
- 关键词：营养状况细胞增殖细胞自噬空泡化成瘤性
- 脂肪间充质干细胞治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的效果被引量：2
- 2016年
- 目的：观察脂肪间充质干细胞（ADMSC）移植治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠的疗效。方法：实验第0、7天采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白作为抗原与完全弗氏佐剂免疫小鼠,ADMSC组（n=14）小鼠于免疫后第14、21、28天尾静脉注射ADMSC（5.5×10^6个/只）,EAE组（n=13）注射同等体积的生理盐水;对照组（n=12）不免疫,不给予ADMSC。实验过程中对小鼠进行神经功能缺损评分;第33天,取脊髓行病理观察,进行炎性细胞浸润评分和脱髓鞘评分;ELISA法检测小鼠外周血TNF-α、IL-17和IL-4水平;流式细胞术测定小鼠脾脏中CD4＋Foxp3＋T细胞（Treg）的比例。结果：与EAE组相比,ADMSC组小鼠神经功能缺损评分、脊髓组织中炎性细胞浸润和脱髓鞘评分降低（P〈0.05）;外周血IL-4水平升高,而TNF-α和IL-17水平降低（P〈0.05）;脾脏中Treg细胞比例明显升高（P〈0.05）,接近对照组水平。结论：ADMSC移植可显著改善EAE小鼠的神经功能。
- 薛鹏李金凤刘新珊刘金刘凤姣秦亚茹段海峰王运良
- 关键词：多发性硬化脂肪间充质干细胞自身免疫性脑脊髓炎调节性T细胞小鼠
- Ad5F11p-GFP对CIK和NK-92细胞的转染效率及生物学特性的影响被引量：1
- 2016年
- 目的:研究Ad5F11p载体对CIK和NK-92细胞的转染效率及生物学特性的影响,预测Ad5F11p载体在免疫治疗中的应用。方法:用Ad5F11p-GFP以不同的MOI(转染复数)转染原代免疫细胞CIK和免疫细胞系NK-92,并以未转染病毒的两种免疫细胞作为阴性对照;用流式细胞术检测荧光阳性细胞比例,用显微镜观察形态学变化,用台盼蓝染色计数分析细胞的增殖,并用LDH法检测NK-92对白血病细胞系K562和HL-60的杀伤作用。结果:25MOI的Ad5F11p-GFP对NK-92的转染效率可以达到大约90%,200 M OI的Ad5F11p-GFP对CIK转染效率不到40%,同一M OI在48 h和96 h时转染效率基本不变;转染Ad5F11p-GFP的免疫细胞容易聚团,增殖减慢,IFN-γ的释放增加并且对肿瘤的杀伤活性增强。结论:Ad5F11p载体修饰的NK-92在过继性免疫治疗中有较好的应用前景。
- 徐赞美陆颖赵兰君刘金胡显文吴祖泽段海峰
- 关键词：NK-92细胞过继性免疫治疗转染效率
- 间充质干细胞的条件培养上清对PC12细胞帕金森病模型增殖的影响
- 2015年
- 目的探讨间充质干细胞(MSC)的条件培养上清对PC12细胞及其帕金森病(PD)模型增殖的影响。方法组织块贴壁法从脐带组织中分离出长梭形细胞,用流式细胞术鉴定其免疫表型,用碱性磷酸酶染色法鉴定其分化能力;用刀豆素A(Con A)刺激MSC后收集其条件培养上清,观察MSC条件培养上清与正常MSC上清对PC12及其PD模型细胞增殖能力的影响,采用酶联免疫吸附测定法检测2种上清内粒细胞集落刺激因子(G-CSF)水平。结果经实验分离的MSC高表达干细胞表面标志CD105、CD73、CD90,而不表达造血细胞表面标志CD19、CD34和CD45,符合MSC表型特征。MSC经Con A处理后,表型未发生变化。MSC具有良好的成骨、成脂分化能力,经Con A处理的MSC,其成骨、成脂分化能力未发生明显变化。与正常MSC上清比较,经Con A处理后的MSC条件上清可显著提高PC12细胞及其PD模型细胞的增殖能力(P<0.05)。经过Con A诱导的MSC条件培养上清中G-CSF水平为(32.13±0.31)ng·L-1,未经处理的MSC上清中G-CSF水平为(11.13±0.28)ng·L-1,经过Con A诱导的MSC条件培养上清中G-CSF水平显著高于未经处理的MSC上清(P<0.05)。结论 Con A可促进PC12细胞及其PD模型细胞增殖,G-CSF可能参与了促进PC12细胞及其PD模型细胞增殖的过程。
- 刘旻刘金刘新珊李鹏飞苏忠玉李彤段海峰
- 关键词：间充质干细胞PC12细胞帕金森病增殖粒细胞集落刺激因子
