杨剑锋
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 供职机构：苏州大学唐仲英血液学研究中心更多>>
- 发文基金：江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 双抗体夹心ELISA测定人血浆可溶性血管内皮钙粘蛋白方法的建立及其应用研究被引量：4
- 2017年
- 目的:建立测定人血浆可溶性血管内皮钙粘蛋白(sVE-cadherin)浓度的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,并探讨其临床应用价值。方法:应用原核表达的人VE-cadherin重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,采用棋盘格滴定法筛选出最佳双抗体组合,其中检测抗体采用辣根过氧化物酶(HRP)标记,建立检测人血浆sVE-cadherin双抗体夹心ELISA方法,并进行方法学评价。同时采用该法检测28名健康体检者和60例肿瘤患者的血浆sVE-cadherin浓度。结果:经筛选共获得6株单克隆抗体,通过筛查配对,成功建立检测人血浆可溶性VE-cadherin的双抗体夹心ELISA方法。该方法的检测限为24.7 pg/ml,批内变异系数(CV)为4.1%-7.7%,批间CV为8.7%-10.8%,平均回收率为96.7%。用该法检测28名健康体检者血浆VE-cadherin浓度为262.1±11.75 pg/ml,而用该方法检测24例白血病患者血浆VE-cadherin浓度为173.9±17.98 pg/ml,显著低于正常人(P<0.01),14例胃癌患者血浆VE-cadherin浓度为311.7±25.24 pg/ml(P>0.05),11例肺癌患者血浆VEcadherin浓度为206.8±25.01 pg/ml,均低于正常人(P<0.05),11例其他肿瘤(9例乳腺癌,1例胶质瘤,1例肝癌)患者血浆VE-cadherin浓度为310.7±11.82 pg/ml(P>0.05)。结论:建立的双抗体夹心ELISA试剂盒有较好的灵敏度及特异性,可用于人血浆中可溶性VE-cadherin含量的检测,并可作为肿瘤诊断的一种新检测指标。
- 丁洁何杨杨剑锋左斌杨炳华阮长耿
- 关键词：双抗体夹心酶联免疫吸附试验
- 一株抗人血小板膜糖蛋白Ibα人鼠嵌合型单克隆抗体及其应用
- 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种具有与血小板膜糖蛋白的高特异性、高亲合力结合并具有抗血栓生物活性的嵌合型单克隆抗体及其应用；一种抗人血小板膜糖蛋白Ibα人鼠嵌合型单克隆抗体，其特征在于，包括鼠源重链可变区、鼠源轻链可...
- 阮长耿赵益明季顺东杨剑锋江淼沈飞
- 一株抗人血小板膜糖蛋白Ibα人鼠嵌合型单克隆抗体及其应用
- 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种具有与血小板膜糖蛋白的高特异性、高亲合力结合并具有抗血栓生物活性的嵌合型单克隆抗体及其应用；一种抗人血小板膜糖蛋白Ibα人鼠嵌合型单克隆抗体，其特征在于，包括鼠源重链可变区、鼠源轻链可...
- 阮长耿赵益明季顺东杨剑锋江淼沈飞
- 文献传递
- 一种血管性血友病因子瑞斯托霉素辅因子酶联免疫试剂盒
- 本发明公开了一种血管性血友病因子瑞斯托霉素辅因子酶联免疫试剂盒，包括：固相化包被抗体的酶标板，辣根过氧化物酶标记的检测抗体，标准品，瑞斯托霉素，重组GPIbαH1-V289片段-Fc融合蛋白，样品稀释缓冲液，显色液，终止...
- 赵益明阮长耿季顺东杨剑锋
- 文献传递
- 人血管内皮钙黏蛋白5单克隆抗体的制备及应用被引量：1
- 2016年
- 目的制备并鉴定人血管内皮钙黏蛋白5(VECDH5)的单克隆抗体(m Ab)。方法用重组原核人VECDH5蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术进行细胞融合;间接ELISA筛选阳性克隆,得到稳定分泌抗VECDH5抗体的杂交瘤细胞株,ELISA测定其效价;Western blot法、流式细胞术、免疫荧光细胞化学染色、免疫组织化学染色鉴定其特异性及抗原表位。结果制备并获得1株可分泌特异性抗VECDH5的杂交瘤细胞株(2C11)。ELISA测定腹水效价高达1∶10 000。多种方法均证实该抗体能特异性识别人VECDH5蛋白,并可在上述不同方法中应用。经抗原表位鉴定,研究制备的2C11识别的氨基酸序列为LDREVVPWYNLTVEA。结论成功制备了亲和力高、特异型好的抗人VECDH5的m Ab。
- 丁洁何杨杨剑锋左斌杨炳华
- 关键词：单克隆抗体
