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王娇娇

作品数:3 被引量:4H指数:2
供职机构:浙江理工大学生命科学学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金上海市自然科学基金更多>>
相关领域:生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 2篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 2篇病毒
  • 2篇病毒复制
  • 1篇蛋白
  • 1篇痘病
  • 1篇痘病毒
  • 1篇痘苗
  • 1篇痘苗病毒
  • 1篇信号
  • 1篇信号通路
  • 1篇抑制病毒
  • 1篇抑制病毒复制
  • 1篇英文
  • 1篇通路
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞系
  • 1篇雷帕霉素
  • 1篇雷帕霉素靶蛋...
  • 1篇基因
  • 1篇基因敲除
  • 1篇谷氨酰胺

机构

  • 3篇浙江理工大学
  • 2篇中国科学院上...
  • 1篇上海交通大学...
  • 1篇同济大学
  • 1篇浙江省医学科...

作者

  • 3篇王娇娇
  • 2篇刘新垣
  • 1篇吴帅
  • 1篇章康健
  • 1篇周秀梅
  • 1篇杨远勤
  • 1篇刘锡君
  • 1篇褚亮
  • 1篇阎辉
  • 1篇张新敏
  • 1篇倪爱民
  • 1篇尹晓飞
  • 1篇徐燕妮
  • 1篇董文洁
  • 1篇陈健华

传媒

  • 3篇中国细胞生物...

年份

  • 1篇2017
  • 2篇2016
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
利用CRISPR/Cas9基因编辑系统构建TP53基因敲除HeLa细胞系(英文)被引量:2
2016年
该研究利用CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR associated protein 9)基因编辑系统构建了TP53(tumor antigen p53)基因敲除He La细胞系。CRISPR/Cas9系统能够精确地切开TP53基因并在双链断裂处插入选择标记(通过与供体质粒进行同源重组获得)。进一步的功能试验表明,TP53基因敲除的He La细胞拥有更强的细胞增殖能力、化疗耐药性以及氧化应激能力,提示He La(TP53–/–)恶性程度增强。所有的数据旨在描述一个简单和有效的方法,即通过CRISPR/Cas9系统来构建基因缺失细胞系,期望在较大程度上帮助研究和阐明基因功能以及细胞机制。
董文洁杨远勤方先龙尹晓飞徐燕妮王娇娇褚亮王如伟方玲吴帅刘新垣
关键词:TP53基因敲除
谷氨酰胺激活PI3K/Akt信号通路促进痘苗病毒复制
2017年
谷氨酰胺(glutamine,Gln)在细胞生长和代谢过程中起重要作用,能够激活磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/哺乳动物雷帕霉素蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)信号通路。多种病毒能通过PI3K/Akt信号通路维持细胞生存和抑制细胞凋亡,维持病毒的感染。为了探讨Gln在痘苗病毒(vaccinia virus strain western reserve,WR)感染人肺癌细胞A549过程中的调控作用及其潜在机制,该文通过蛋白免疫印迹(Western blot)检测PI3K/Akt信号通路蛋白质磷酸化水平,流式细胞术检测细胞阳性率,结晶紫染色检测WR滴度,实时定量PCR(quantitative Real-time PCR,q PCR)检测WR基因E3L和A46R m RNA水平。结果显示,Gln处理后PI3K/Akt信号通路蛋白质磷酸化水平显著升高。抑制PI3K/Akt信号通路后,细胞阳性率显著降低(P<0.05),WR滴度显著降低(P<0.05),WR基因E3L和A46R m RNA水平显著降低(P<0.05)。该研究结果表明,Gln通过激活PI3K/Akt信号通路从而促进A549细胞中WR的复制。
许婉彬王娇娇陈健华周秀梅王如伟方玲阎辉
关键词:谷氨酰胺痘苗病毒PI3K/AKT信号通路哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
CRISPR/Cas9切割痘病毒DNA抑制病毒复制被引量:2
2016年
当前,CRISPR/Cas9系统靶向痘苗病毒的相关研究鲜有报道。该文采用了CRISPR/Cas9基因组定点编辑技术,以痘病毒为研究对象。在重组痘病毒WR-EGFP中针对EGFP基因序列设计不同靶点g RNAs,转染Cas9/g RNA质粒,同时感染WR-EGFP痘病毒,随后观察EGFP荧光表达、提取病毒基因组,通过PCR进行切口鉴定并运用错配酶切法验证CRISPR/Cas9对痘病毒靶点DNA切割的切口修复情况。与单独感染WR-EGFP组相比,转染了Cas9/g RNA174和Cas9/g RNA175质粒的EGFP荧光强度明显降低,表明CRISPR/Cas9抑制WR-EGFP病毒中EGFP基因的表达。相对定量PCR及错配酶切实验结果显示,CRISPR/Cas9切割靶点导致WR-EGFP病毒基因组产生了切口,并且存在DNA错配修复现象。最后,通过结晶紫染色法测定痘病毒的滴度,结果显示,经CRISPR/Cas9处理组的痘病毒滴度显著下降,即CRISPR/Cas9能够使痘病毒的复制能力显著地降低。综上所述,CRISPR/Cas9切割痘病毒基因组DNA并且抑制痘病毒复制。
王娇娇张新敏倪爱民章康健刘新垣刘锡君
关键词:痘病毒病毒复制
共1页<1>
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