方珂
- 作品数：4 被引量：20H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肠道免疫系统与糖尿病关系的研究进展被引量：10
- 2016年
- 糖尿病（diabetes mellitus,DM）发病率呈稳定上升趋势,除基因突变、环境因素外,由于肠道免疫系统是接触饮食抗原的第一防护线,肠道病毒感染、口服牛乳或麸质蛋白抗原、肠道菌群等引起的肠道变化被证实与DM发病有关。一系列研究证据表明肠道免疫系统参与DM发病过程。
- 巩静董慧王定坤方珂胡美霖陆付耳
- 关键词：糖尿病免疫细胞免疫疗法
- 糖尿病与甲状腺疾病密切相关的病理生理基础被引量：9
- 2016年
- 糖尿病和甲状腺功能紊乱是成年人中最常见的内分泌疾病。胰岛素是人体唯一的降血糖激素;甲状腺激素通过交感神经系统、对葡萄糖转运体的调控以及与皮质激素交联参与了血糖的调控,两者相互作用、相互影响,共同维持人体内分泌平衡。然而受遗传、自身免疫、体内外环境变化诸如遗传基因易患性、自身抗体的产生和细胞因子的影响,这种平衡被破坏,导致糖尿病和甲状腺疾病同时或相继出现。因此,如何认识两者之间的联系显得尤为重要。
- 方珂陆付耳
- 关键词：糖尿病甲状腺功能亢进甲状腺功能减退胰岛素抵抗
- 陆付耳教授运用孙子兵法原理治疗糖尿病肾病经验
- 2024年
- 糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)是糖尿病最常见和最严重的微血管并发症之一,是导致终末期肾病的主要病因,也是糖尿病患者的主要死因之一。据估计,中国内地人民糖尿病患病率高达11.2%[1],有20%~40%的糖尿病患者可进展为DKD[2]。DKD发病机制复杂,现代医学主要通过干预患者生活方式以及控制血压、血糖、血脂来延缓DKD进展,近年来随着钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂、胰高血糖素样肽受体激动剂及二肽基肽酶4抑制剂的面世及应用,为DKD患者带来了更多的选择。与此同时,中医药在DKD的防治过程中取得了较好疗效。陆付耳教授是第六批全国老中医药专家学术经验继承工作指导老师,湖北中医名师,国家中医药管理局中医内分泌临床重点专科学术带头人,二级教授、主任医师、博士生导师,华中学者。陆付耳教授是中西医结合内分泌与代谢性疾病的专家,从事临床实践与实验研究40余载,博览群书,纵览古今,对糖尿病及其并发症的防治颇有造诣。笔者有幸师从陆付耳教授学习,发现其临证时常将中医辨证组方与孙子兵法的排兵布阵相结合,屡获佳效,现将其治疗DKD的临证经验加以整理,供同道参考。
- 方珂王定坤巩静董慧陆付耳
- 关键词：糖尿病肾病孙子兵法补肾健脾解毒利湿化痰散结平衡阴阳
- 大鼠靶向α7nAchR基因shRNA真核表达载体及重组腺病毒构建被引量：1
- 2017年
- 目的构建大鼠烟碱样乙酰胆碱受体α7亚型(α7nAchR)基因短发夹RNA(shRNA)真核表达载体。方法设计并合成编码α7nAchR基因shRNA的DNA模板引物AY318、AY857、AY444+559、AY318+857,并分别与线性化的质粒载体pGenesil-1.1、pGenesil-1.4、pGenesil-1.2,pGenesil-1.3连接,以构建可以编码1条α7nAchR基因shRNA和编码2条α7nAchR基因shRNA的重组质粒载体;重组质粒载体感染感受态的DH5a细胞,提取细菌质粒进行特定酶切,并用1%的琼脂糖凝胶电泳以鉴定重组质粒是否构建成功;用LR体外同源重组法将AY318、AY444+559、AY857shRNA表达框分别从重组质粒pGenesil转移至腺病毒pGSadeno质粒表达载体上,构建重组腺病毒质粒;用相同的方法感染DH5a细胞,并鉴定重组腺病毒pGSadeno质粒是否构建成功;提取线性化的重组腺病毒DNA并转染包装细胞HEK293,经放大培养获得滴度为1.0×1010pfu/mL的重组腺病毒上清;将重组腺病毒感染大鼠GH3垂体瘤细胞,以PCR反应鉴定重组腺病毒载体的α7nAchR基因干扰效果。结果通过酶切片段及其大小,初步判断AY318、AY857、AY444+559、AY318+857shRNA成功重组入质粒载体,重组腺病毒pGSadeno-shRNA包装成功;重组腺病毒感染HEK293细胞,在荧光显微镜下有绿色荧光蛋白表达;重组腺病毒感染GH3细胞后α7nAchR mRNA表达显著减少,且pGSadeno-AY857shRNA干扰效果最明显(85%)。结论具有感染力和干扰大鼠α7nAchR基因表达的shRNA真核表达载体构建成功,且pGSadeno-AY857shRNA具有最强的基因干扰效果。
- 王定坤陆付耳邹欣任妍林董慧巩静方珂徐丽君王开富
- 关键词：SHRNA基因干扰重组质粒重组腺病毒
