孙跃峰
- 作品数：81 被引量：17H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项青海省科技计划项目国家绒毛用羊产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 一种A型口蹄疫病毒的可视化快速检测试剂盒及其制备方法
- 本发明提供了一种A型口蹄疫病毒的可视化快速检测试剂盒及其制备方法，属于病毒检测技术领域。A型口蹄疫病毒的可视化快速检测试剂盒，包括包被酶标板、洗涤液、血清稀释液、底物显色液、酶标二抗、终止液、阳性标准品和阴性标准品，所述...
- 陈豪泰张永光孙跃峰祁林林张杰潘丽
- 文献传递
- 猪德尔塔冠状病毒LFD-RPA快速检测引物探针组及试剂盒
- 本发明涉及猪德尔塔冠状病毒LFD‑RPA快速检测引物探针组及试剂盒，属于生物技术领域。本发明提供的引物探针组，包括上游引物、下游引物和探针；所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述下游引物为在SEQ I...
- 刘新生王永录方玉珍周鹏张永光潘丽孙跃峰张丽萍
- 文献传递
- 猪瘟病毒抗体间接化学发光定性检测试剂盒及其检测方法
- 本发明公开了一种猪瘟病毒抗体间接化学发光定性检测试剂盒，包括96孔抗原包被化学发光板、标准阴性血清、标准阳性血清、酶标猪二抗、血清稀释液、化学发光底物液；本发明还公开了所述试剂盒进行猪瘟病毒抗体化学发光检测方法，本发明将...
- 张永光潘丽孙跃峰马中元吕建亮常惠芸祁林林陈豪泰
- 文献传递
- 羊口疮病毒ORF112基因缺失毒株的构建及增殖能力分析
- 2024年
- 利用同源重组技术构建羊口疮病毒(orf virus,ORFV)ORF112基因缺失毒株,为后续研制出高效、安全的ORFV基因工程疫苗提供候选毒株。以ORF112基因为靶基因,通过重叠PCR的方法将左、右同源臂及绿色荧光蛋白(EGFP)基因表达框,进行融合后与pUC19T载体连接,构建出pUC19T-ORFV-ΔORF112-EGFP基因转移载体。将转移载体重组质粒转染到Vero细胞与WT-ORFV基因组进行同源重组。采取有限稀释法和挑取单细胞克隆法,筛选并纯化出纯合的ORFV-ΔORF112-EGFP毒株,并对该基因缺失毒株遗传稳定性和增殖特性等进行研究。结果显示:利用有限稀释和挑取单细胞克隆方法,进行阳性重组病毒纯化,通过PCR验证和测序,成功地获得ORFV-ΔORF112-EGFP重组毒株。该重组毒株在系列传代过程中EGFP稳定表达且无减弱现象。该重组ORFV-ΔORF112-EGFP毒株与野生毒株的复制生长特性基本一致。成功构建并筛选得到纯化的ORFV-ΔORF112-EGFP基因缺失毒株,该毒株具有良好的遗传稳定性和复制能力,为后续ORFV基因工程疫苗的研制提供了候选毒株。
- 尤婷任善会王萌张红强高小龙姚威王卉杨雪马春玲柳民意张玉哲王金龙孙跃峰陈豪泰王桂荣
- 关键词：羊口疮病毒同源重组基因缺失
- 重组小反刍兽疫病毒血凝素蛋白纯化体系的优化
- 2024年
- 本试验利用发酵技术诱导表达了小反刍兽疫病毒H蛋白胞外区(PPRV tH),优化建立了一套纯化重组PPRV tH的完整工艺体系。通过发酵表达获得的10 L菌液,菌体湿重约达30 g/L,均质机破碎菌体获得包涵体;Tris-0缓冲液(pH=8.0)洗涤包涵体3次,每1 g包涵体加入5 mL含20 mmol/L咪唑的Tris-E缓冲液(pH=8.0)重悬,4℃温和旋转溶解过夜,离心收集上清;按体积比1∶2将层析填料Chelaing Sepharose Fast Flow与上清混匀,以流速1~2 mL/min加入层析柱;依次通过10倍柱体积含50、100、400和500 mmol/L咪唑的Tris-E缓冲液(pH=8.0),4℃静置2 h进行洗脱。优化后的纯化体系可得到较纯的重组PPRV tH蛋白,利用灰度分析可知纯化后的重组PPRV tH蛋白纯度能达到85%。本试验提供的纯化体系可快速、简便、低成本、大批量纯化重组PPRV tH蛋白,而且纯化获得的PPRV tH蛋白具有良好的反应原性。
- 胡林杰朱学亮彭泓蛟邓瑞雪潘春容孙跃峰蒙学莲
- 关键词：小反刍兽疫病毒血凝素蛋白蛋白纯化
- 牛结节性皮肤病病毒ORF006蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：1
- 2023年
- 为探究牛结节性皮肤病病毒(LSDV)ORF006蛋白的生物学功能,制备了ORF006基因的多克隆抗体,用PCR技术获得LSDV ORF006的基因片段克隆至pET-28a原核表达载体,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)后进行IPTG诱导表达,将纯化后的蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。结果显示,LSDV ORF006基因全长约696 bp;pET-28a-ORF006重组质粒在大肠杆菌中于37℃经1 mmol/L的IPTG诱导12 h,成功表达约28.0 ku目的蛋白;ELISA结果显示,制备的多克隆抗体效价为1∶102400;Western-blot结果显示,制备的多克隆抗体能特异性识别ORF006蛋白;间接免疫荧光试验表明,制备的多克隆抗体能够特异性识别LSDV感染MDBK细胞表达的ORF006蛋白。本研究为进一步探究LSDV ORF006蛋白生物学功能奠定了基础。
- 马小琴王莎莎胡林杰姚凯慎任善会王相伟孙跃峰殷相平
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 一种特异性结合小反刍兽疫病毒磷蛋白的单克隆抗体
- 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种特异性结合小反刍兽疫病毒磷蛋白的单克隆抗体。本发明公开了一种抗小反刍兽疫病毒磷蛋白的单克隆抗体16E8A6，所述单克隆抗体16E8A6的序列包含SEQ ID NO.7所示重链可变区和S...
- 蒙学莲赵帅阳朱学亮孙跃峰
- 一种识别牛结节性皮肤病病毒ORF29蛋白的B细胞连续性线性及构象型抗原表位、抗原表位关键性氨基酸位点及其应用
- 本发明涉及生物医学领域，为一种识别牛结节性皮肤病病毒ORF29蛋白B细胞的连续性线性及构象型抗原表位、抗原表位关键性氨基酸位点及其应用，识别牛结节性皮肤病病毒ORF29蛋白的B细胞连续性线性表位，该线性表位序列为INNP...
- 任善会孙跃峰殷相平陈豪泰郜晓虹王相伟高小龙
- ssc-miR-4331-5p用于检测口蹄疫感染的试剂盒和治疗口蹄疫的药物
- 本发明提出了ssc‑miR‑4331‑5p用于检测口蹄疫病毒感染的试剂盒和治疗口蹄疫病毒感染的药物。检测口蹄疫病毒感染的试剂盒，该试剂盒用于检测ssc‑miR‑4331‑5p的表达水平。试剂盒包含检测ssc‑miR‑43...
- 孙跃峰任亭亭王妍鳕
- 三株LSDV ORF29单克隆抗体的重链和轻链可变区基因序列、两种表达免疫球蛋白全基因序列及其应用
- 本发明涉及生物医学技术领域，具体为三株LSDV ORF29单克隆抗体的重链和轻链可变区基因序列、两种表达免疫球蛋白全基因序列及其应用，本发明利用杂交瘤测序，提取杂交瘤细胞(1C1‑4D11、3C4‑2E9和1E1‑2C1...
- 任善会孙跃峰殷相平陈豪泰郜晓虹王相伟高小龙
