李娜娜
- 作品数：8 被引量：4H指数：1
- 供职机构：山西农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：山西省回国留学人员科研经费资助项目山西省科技攻关计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学一般工业技术轻工技术与工程更多>>
- 肉鸡谷胱甘肽S-转移酶A3基因的克隆及蛋白的表达和纯化
- 2019年
- [目的]谷胱甘肽S-转移酶A3(GSTA3)是GSTs超家族中α家族的一员,具有解毒功能,同时还参与抗氧化应激引起的信号通路调节,另外在类固醇和前列腺素的合成中也必不可少。[方法]本试验采用RT-PCR方法扩增肉鸡GSTA3基因,连接pZeroBack/blunk克隆质粒,再与表达载体pET-28a连接,并转入E.coli BL21(DE3)中获得pET-28a-GSTA3重组表达质粒,使用IPTG诱导其蛋白的表达,应用镍柱亲和层析法纯化蛋白,并对其进行SDS-PAGE鉴定,使用谷胱甘肽-S转移酶活性测定试剂盒对重组蛋白进行活性检测。[结果]试验成功构建重组表达质粒pET-28a-GSTA3,并在大肠杆菌中成功表达,其大小为29.6 kDa,与预期一致,并且表达的重组GSTA3蛋白具有生物活性。[结论]本试验成功获得高纯度的可溶性GSTA3融合蛋白,为其在家禽领域的进一步研究奠定了基础。
- 卢晓晓杨世雄李娜娜张宁李欣宁官保张鼎赵宇军闫芳高荣琨田文霞
- 关键词：胫骨软骨发育不良基因克隆原核表达
- 塞来昔布对福美双诱导的肉鸡TD中COX-1/2、ColⅩ和MMP-13表达的影响
- 目的:研究环氧酶通路与肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)早期发生关系.
方法:参照本课题组前期研究方法复制肉鸡TD早期模型.通过添加塞来昔布,观察肉鸡早期临床症状,生长板剖检形态,进行TD评价,并应用荧光定量PCR,...
- 喻进宁官保李宏全马海利高文伟赵宇军高诗敏李桂兰李建慧闫芳陈书明张晨亮田文霞赵晋锋卢晓晓李娜娜王倩倩李欣张宁张鼎
- 关键词：肉鸡胫骨软骨发育不良塞来昔布环氧酶基质金属蛋白酶13
- 文献传递
- GSH对四甲基秋兰姆二硫化物诱导肉鸡TD的预防与治疗效果
- 引言胫骨软骨发育不良（Tibial dyschondroplasia,TD）是肉鸡最常见的腿病之一,以软骨内骨化受阻和胫骨干骺端的软骨细胞增生形成无血管的玉白色的'软骨楔'为特征[1]。其发病机理的研究仍是目前研究的热点...
- 张晨亮李娜娜卢晓晓宁官保李宏全马海利赵宇军高文伟李绪英任家琰闫芳高诗敏陈书明田文霞
- 福美双诱导的肉鸡胫骨生长板异常增殖软骨细胞相关基因表达研究
- 目的：探讨HDAC1、MTA1、H4、PCNA等与肿瘤发生和发展相关基因的差异表达与肉鸡TD发生之间的相关性.
方法：利用课题组已建立的肉鸡TD模型,采用荧光定量PCR技术及免疫组织化学技术,对TD模型胫骨生长...
- 张晨亮宁官保李宏全马海利高文伟赵宇军高诗敏李桂兰李建慧闫芳陈书明赵晋锋田文霞喻进王倩倩卢晓晓李娜娜李欣张宁张鼎
- 关键词：胫骨软骨发育不良福美双
- 文献传递
- 重组鸡细胞外脂肪酸结合蛋白的原核表达及鉴定被引量：3
- 2020年
- 细胞外脂肪酸结合蛋白(Extracellular Fatty Acid-Binding Protein,Ex-FABP)是一种鸡胚发育过程中表达于肥大软骨、肌肉纤维和血粒细胞中的脂蛋白,大小约为21 ku。试验通过构建Ex-FABP原核表达载体,以实现Ex-FABP蛋白的大量表达,并对其进行纯化及鉴定;以艾维茵肉鸡胫骨软骨总RNA为模板,RT-PCR扩增Ex-FABP基因,连接pGEM-T克隆载体后,再与载体pET-28a连接并转化,获得含pET-28a-Ex-FABP重组表达质粒的Escherichia coli BL21(DE3)表达菌株;使用IPTG诱导表达蛋白,SDS-PAGE鉴定表达情况,利用镍柱亲和层析法纯化蛋白,对纯化蛋白进行Western Blot鉴定。结果表明,试验成功构建重组表达载体pET-28a-Ex-FABP;表达产物经SDS-PAGE和Western Blot鉴定,结果显示,目的蛋白在24 ku附近出现特异性条带,表明表达蛋白正确。试验成功表达了大量纯度比较高的Ex-FABP蛋白,可为后续的动物试验以及家禽疾病的研究提供理论依据。
- 田志雄李娜娜卢晓晓郭敏张宁李欣张鼎赵宇军闫芳高荣琨宁官保田文霞
- 关键词：基因克隆原核表达蛋白纯化
- 福美双诱导的TD肉鸡生长板中p-STAT3、SOCS3的时序性表达研究
- 目的：研究旨在观察p-STAT3与SOCS3在肉鸡TD发生过程中的时序性表达,初步探讨JAK-STAT信号通路与肉鸡TD的相关性.
方法：利用实验室建立的肉鸡TD模型,采用Real-time qPCR、免疫组化...
- 赵晋锋宁官保李宏全马海利高文伟赵宇军高诗敏李桂兰李建慧闫芳陈书明张晨亮田文霞喻进李娜娜卢晓晓王倩倩张宁李欣张鼎
- 关键词：肉鸡胫骨软骨发育不良生长板时序性表达
- 文献传递
- 重组鸡GSTA3蛋白对福美双诱导的TD肉鸡血清中Bax含量的影响被引量：1
- 2017年
- 为研究谷胱甘肽硫转移酶A3(GSTA3)对胫骨软骨发育不良(TD)肉鸡血清中凋亡因子Bax的影响,试验将90羽1日龄AA肉仔鸡预饲7 d后,随机分为6组(A,B,C,D,E和F组),分别在8,9日龄对D,E,F组饲喂添加100 mg/kg福美双的日粮,将饲喂基础日粮组(A,B,C组)和添加福美双日粮组(D,E,F组)的肉鸡各分对照组(A,D组)、重组GSTA3蛋白低剂量(20μg/kg)注射组(B,E组)和高剂量(50μg/kg)注射组(C,F组),在试验第8,10,12天腿部肌肉注射重组GSTA3蛋白,对照组注射稀释用PBS。在饲喂福美双后第1,2,4天分别采集各组肉鸡血液、分离血清,利用ELISA方法测定肉鸡血清中Bax的含量。结果显示,低剂量的重组GSTA3蛋白显著降低第2天基础日粮(B)组肉鸡血清中Bax的浓度,同时显著降低第4天福美双处理(E)组肉鸡血清中Bax的浓度;高剂量的重组GSTA3蛋白显著降低第4天基础日粮(C)组和福美双处理(F)组肉鸡血清中Bax的浓度。低剂量的重组鸡GSTA3蛋白对降低TD肉鸡血清中Bax含量的效果较好,这一研究将为肉鸡TD的防治提供新的方向和研究基础。
- 张宁李桢李娜娜张旭华张靖陈柳妃宁官保张鼎田文霞
- 关键词：肉鸡胫骨软骨发育不良BAX
- 重组鸡GSTA3蛋白对福美双诱导肉鸡TD的血清GST-α含量的影响
- 2017年
- 为研究重组鸡GSTA3蛋白对肉鸡TD抗氧化功能的影响,先构建肉鸡TD模型,即通过肌肉注射不同剂量(20,50μg/kg)的原核表达鸡GSTA3蛋白,运用ELISA技术检测血清中GST-α的含量。结果表明,与空白组相比,饲喂福美双第1,2,4天,血清GST-α的含量显著上升(P<0.05),注射蛋白组与饲喂福美双组相比,试验第1天,GST-α的含量没有显著差异,试验第2,4天,GST-α的含量显著降低(P<0.05),而高剂量组与低剂量组之间GST-α的含量无显著性差异。GSTA3可通过修复肝脏损伤增强其抗氧化能力,直接或间接调节软骨组织中软骨细胞在TD发生过程中的功能。
- 李欣李桢李娜娜张旭华张靖陈柳妃宁官保张鼎田文霞
- 关键词：肉鸡胫骨软骨发育不良抗氧化功能
