孙雪娇
- 作品数：5 被引量：27H指数：2
- 供职机构：山西医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山西省自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Aurora蛋白激酶抑制剂VX-680对人肝癌细胞HepG2细胞间同质黏附力和迁移能力的影响被引量：5
- 2018年
- 目的:研究Aurora蛋白激酶抑制剂VX-680对人肝癌细胞HepG2细胞间同质黏附力和迁移能力的影响。方法:分别设立实验组和对照组:实验组加VX-680,总共设置3个浓度组(3.125μmol/L组、6.25μmol/L组和12.5μmol/L组);对照组加DMSO。采用细胞缓慢聚集实验和分离实验观察不同浓度VX-680对HepG2细胞间黏附能力的影响。通过划痕愈合实验检测不同浓度VX-680对Hep G2细胞迁移能力的影响。Western blot检测HepG2细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达。结果 :细胞缓慢聚集实验结果显示,相比对照组,各实验组细胞所形成的细胞团块数均明显减少(P<0.01)。细胞分离实验结果显示,随着VX-680浓度的升高,N_(TC)/N_(TE)的比值逐渐降低,即细胞间黏附能力逐渐增强。划痕愈合实验结果显示,相比对照组,随着VX-680浓度的升高,细胞划痕愈合能力逐渐减弱。Western blot实验结果显示HepG2细胞中E-cadherin的表达随着VX-680浓度的升高而增加(P<0.05)。结论 :VX-680可以增加人肝癌细胞HepG2细胞间的同质黏附力,同时抑制其迁移。
- 任本洪孙雪娇郝跃鹏寇俊婷牛仕诗杨成园王晓霞
- 关键词：肝癌
- 顺铂耐药对食管癌细胞增殖、凋亡、迁移和血管生成的影响被引量：22
- 2017年
- 目的:探讨顺铂(cis-dichlorodiamine platinum,cDDP)耐药对人食管癌KYSE150细胞增殖、凋亡、迁移和血管生成的影响。方法:首先采用顺铂浓度递增的方法,历经10个月左右的时间成功建立了人食管癌顺铂耐药细胞系KYSE150/cDDP。采用MTT法测定其药物敏感性,并通过形态学观察、MTT实验、集落形成实验、DAPI染色、划痕愈合实验及小管形成实验比较顺铂耐药后食管癌细胞生物学行为的改变。结果:KYSE150细胞和KYSE150/cDDP细胞在形态上无明显差异;MTT实验结果显示,与KYSE150细胞相比,KYSE150/cDDP细胞对cDDP的耐药指数为6.35,细胞活力下降;集落形成实验结果显示,KYSE150/cDDP细胞的集落形成率为(15.00±3.05)%,而KYSE150细胞的集落形成率为(86.70±6.57)%;DAPI染色显示KYSE150/cDDP细胞的凋亡率为(0.63±0.09)%,而KYSE150细胞的凋亡率为(8.46±1.33)%;划痕愈合实验显示,与KYSE150细胞相比,KYSE150/cDDP细胞的划痕愈合能力更强,其迁移率较KYSE150细胞的迁移率高;小管形成实验显示,KYSE150/cDDP细胞的血管生成数为76.20±3.18,而KYSE150细胞的血管生成数为50.60±1.33;Western blot实验结果显示KYSE150/cDDP细胞中MMP-2和VEGFR2的表达均高于KYSE150细胞。结论:KYSE150/cDDP细胞具有耐药表型,耐药后生长缓慢,凋亡能力降低,迁移和血管生成能力增加,这可能是临床化疗失败的重要原因。
- 李朝慧任本洪孙雪娇寇俊婷贺春王晓霞
- 关键词：顺铂食管癌细胞迁移血管生成
- IQGAP1高表达抑制食管鳞癌细胞对顺铂化疗的敏感性
- 2023年
- 本文旨在研究含IQ模序的GTP酶激活蛋白1(IQ motif containing GTPase-activating protein 1,IQGAP1)过表达或基因干扰是否影响食管鳞癌细胞对顺铂化疗的敏感性。质粒转染构建IQGAP1高表达和基因干扰的稳定细胞系,并采用Western blot进行鉴定。然后,采用不同浓度(2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L)的顺铂处理细胞,通过3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四氮唑噻唑蓝[3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]法检测IQGAP1高表达、IQGAP1基因干扰和相应对照细胞的活力,通过4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4′,6-Diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色和流式细胞技术检测细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果显示,IQGAP1高表达和基因干扰的稳定细胞系成功建立。在不同浓度的顺铂处理后,MTT结果表明,IQGAP1高表达细胞活力明显高于对照细胞(P<0.05);而IQGAP1基因干扰细胞活力明显低于对照细胞(P<0.05)。DAPI染色和流式细胞检测结果显示,IQGAP1高表达细胞凋亡率明显低于对照细胞(P<0.05),IQGAP1基因干扰细胞凋亡率明显高于对照细胞(P<0.05)。Western blot结果表明,IQGAP1高表达细胞的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3酶原(pro-cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Procaspase-3)和多聚ADP-核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)原带表达水平均高于对照细胞,裂解PARP(cleaved-PARP)的表达水平低于对照细胞,IQGAP1基因干扰细胞的Procaspase-3和PARP原带表达水平均低于对照细胞。研究结果表明,IQGAP1过表达影响凋亡抑制食管鳞癌细胞对顺铂的敏感性,提示IQGAP1过表达是导致顺铂在食管鳞癌细胞中产生耐药的重要机制。干扰IQGAP1表达后能提高食管鳞癌细胞对顺铂化疗的敏感性,提示IQGAP1可能是提高食管鳞癌化疗敏感性的重要治疗靶点。
- 李鑫婷孙雪娇李婷杨子怡杨佳程王正谦赵欣冉李晓钟王晓霞
- 关键词：IQGAP1顺铂化疗耐药食管鳞状细胞癌
- Aurora-A高表达对食管癌细胞与细胞间黏附能力的影响
- 2017年
- 目的探讨Aurora-A高表达对食管癌KYSE150细胞与细胞间黏附能力的影响。方法体外培养人食管癌KYSE150细胞,在Lipofectamine 2000介导下,分别转染高表达质粒p EGFP-C1-Aurora-A及载体p EGFP-C1,同时设空白细胞对照组(未转染)。通过Western blot法检测人食管癌KYSE150细胞中Aurora-A的表达;采用细胞缓慢聚集及细胞分离试验观察Aurora-A高表达对细胞与细胞间黏附能力的影响。结果 Aurora-A高表达组可见相对分子质量约72 000的GFP-Aurora-A融合蛋白条带,而空载体对照组及空白细胞对照组未见该蛋白条带。Aurora-A高表达组、空白细胞对照组及空载体对照组细胞团数分别为(71.0±9.4)、(25.3±0.6)和(28.5±4.0)个,N_(TC)/N_(TE)值分别为0.162±0.026、0.087±0.016和0.080±0.008,Aurora-A高表达组细胞团数及NTC/NTE值明显高于空白细胞对照组及空载体对照组(P<0.05)。结论 Aurora-A高表达能显著降低食管癌细胞与细胞间的黏附能力,进而增加肿瘤细胞的恶性表型。
- 贺春寇俊婷孙雪娇任本洪王晓霞
- 关键词：AURORA-A食管癌细胞
- IQ结构域的GTP酶激活蛋白1基因短发卡RNA重组质粒的构建及表达
- 2019年
- 目的构建特异性针对人IQ结构域的GTP酶激活蛋白1(IQ-domain GTPase-activating protein 1,IQGAP1)基因短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)的重组质粒,检测其在人食管癌KYSE150细胞中的表达。方法以人IQGAP1 mRNA序列为靶向设计合成含有shRNA序列的寡核苷酸,克隆至真核表达载体GV102中,构建重组质粒IQGAP1-shRNA,转化DH5α感受态细胞,挑取阳性克隆测序鉴定。用脂质体2000介导IQGAP1-shRNA转染KYSE150细胞作为IQGAP1-shRNA干扰组,同时设转染载体GV102为对照组,RT-PCR及Western blot法检测IQGAP1基因的干扰效果。结果经测序鉴定,重组质粒IQGAP1-shRNA构建正确。IQGAP1-shRNA干扰组及对照组转染KYSE150细胞均可见绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP),两组转染效率分别为(76±5. 780)%和(83±3. 851)%。IQGAP1-shRNA干扰组IQGAP1 mRNA转录水平和蛋白表达水平与对照组比较差异均有统计学意义(P <0. 001),表达抑制率分别为(82±2. 424)%及(77±2. 791)%。结论成功构建了IQGAP1-shRNA真核表达质粒,能特异性降低食管癌KYSE150细胞中IQGAP1基因的表达,为进一步研究IQGAP1基因在食管癌中的功能及靶向治疗作用奠定了基础。
- 邓青杨成园王安彦牛仕诗郝跃鹏寇俊婷孙雪娇王晓霞
- 关键词：短发卡RNARNA干扰重组质粒食管癌
