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RNA干扰MRP2表达逆转结肠癌细胞对长春新碱的耐药性被引量：3: 2008年; 目的构建MRP2基因的真核表达载体pGenSil-1-MRP2-siRNA,并观察其转染人结肠癌耐长春新碱细胞株HCT-8/V前后MRP2基因和ABCC2蛋白表达变化以及对化疗药物敏感性变化。方法设计MRP2特异性siRNA的序列,克隆至pGenSil-1质粒中,测序鉴定后,用脂质体将重组质粒转染至HCT-8/V细胞中,用定量RT-PCR和Western blot检测MRP2的表达,MTT实验测定pGenSil-1-MRP2-siRNA和长春新碱对HCT-8/V细胞增殖抑制作用。结果在结肠癌耐药细胞HCT-8/V中,RNAi明显抑制了MRP2 mRNA及蛋白的表达,在相同浓度化疗药物的作用下,RNA干扰组细胞凋亡比例显著高于对照组(P<0.01),表明细胞耐药性显著下降,对药物敏感性显著增高。结论成功构建了MRP2的siR-NA真核表达载体,并且对结肠癌耐药细胞MRP2的表达有明显抑制作用,取得良好的逆转耐药效果。; 杨毅姜习新王继见周洪伟; 关键词：多药耐药 MRP2 RNA干扰质粒

维生素A对小儿麻疹病死率影响的Meta分析: 目的：　　采用meta分析评价维生素A是否有利于降低小儿麻疹的病死率。　　方法：　　检索中国期刊全文数据库CNKI、万方数据库、Pubmed、Cochrane图书馆数据库发表年份从1980年1月-2015年12月关于维生...; 杨毅; 关键词：儿童患者维生素A 麻疹病死率 META分析

端粒酶逆转录酶启动子hTERT/U6嵌合启动子的siRNA表达载体的肿瘤靶向性分析: 2008年; 目的:体外研究siRNA-EGFP-hTERT/U6-PTZU6+1表达载体在肿瘤细胞中的靶向性.方法:常规培养稳定表达绿色荧光蛋白的肝癌SMMC-7721细胞株(EGFP-7721)和稳定表达绿色荧光蛋白的人正常成纤维细胞株HELF(EGFP-HELF).以PTZU6+1质粒转染EGFP-7721细胞和EGFP-HELF细胞为空白质粒组,siRNA-EGFP-PTZU6+1质粒转染EGFP-7721细胞和EGFP-HELF细胞为实验对照组,将siRNA-EGFP-hTERT/U6-PTZU6+1质粒转染EGFP-7721细胞和EG-FP-HELF细胞作为实验组,用real-time SYBR Green PCR和Western Blot鉴定siRNA-EGFP-hTERT/U6-PTZU6+1对两种细胞株的绿色荧光蛋白表达的影响.结果:正向和反向的重组质粒siRNA-EGFP-hTERT/U6-PTZU6+1转染EGFP-HELF细胞与空白质粒比较,EGFP基因表达无差异(P>0.05),而转染稳定表达绿色荧光蛋白的7721后仅反向的siRNA-EG-FP-hTERT/U6-PTZU6+1重组质粒抑制EGFP基因的表达(P<0.01).siRNA-EGFP-PTZU6+1质粒与空白质粒组比较,在EGFP-7721和EGFP-HELF细胞株间,EGFP基因的表达均具有统计学差异(P<0.01).结论:反向插入的siRNA-EGFP-hTERT/U6-PTZU6+1重组质粒在肿瘤细胞具有一定靶向性,为进一步探讨基因的靶向治疗奠定了基础.; 姜习新张鹏辉涂植光杨毅刘靳波; 关键词：端粒酶逆转录酶启动子 SIRNA表达载体靶向性

神经重症监护室中结核性脑膜炎并发消化道出血的风险因素及预后影响: 目的：研究神经重症监护室中的成人结核性脑膜炎并发消化道出血的临床特点、风险因素，并探讨消化道出血对预后的影响。　　方法：本研究为回顾性研究。通过电子病历系统调阅六年间(2012年1月-2017年12月)就诊于重庆医科大学...; 杨毅; 关键词：结核性脑膜炎消化道出血

LncRNA UCA1在多发性骨髓瘤中的异常表达及作用机制研究: 背景：LncRNA在许多肿瘤中都是一种新的预后指标和治疗靶点。本研究通过基因文库与生物信息学分析，初步确定lncRNAUCA1和mRNAHGF在多发性骨髓瘤中表达失调，以及miRNA与miR-1271-5p互为靶标，并在...; 杨毅; 关键词：多发性骨髓瘤细胞增殖

RNAi干扰MRP2表达逆转结肠癌细胞对长春新碱的耐药性: 目的化疗一直是以手术为主的大肠癌综合治疗的重要手段,而多药耐药/(multidrug resistance, MDR/)是临床化疗效果不佳的主要原因,多药耐药的发生机制之一是多药耐药相关蛋白2/(multid...; 杨毅; 关键词：结肠癌多药耐药 MRP2 RNAI; 文献传递

端粒酶逆转录酶启动子hTERT／U6嵌合启动子的siRNA表达载体的构建及鉴定被引量：1: 2008年; 目的构建有hTERT/U6嵌合启动子的小干扰RNA(small interfere RNA,siRNA)表达载体,并用分子生物学的技术和方法验证其对肝癌细胞SMMC-7721的效应。方法构建siRNA-EGFP-PTZU6+1表达载体,将其转染到稳定表达EGFP的肝癌细胞株7721(EGFP-7721),观察细胞荧光的变化及RT-PCR,Western blot筛选出更有效的siRNA-EGFP-PTZU6+1载体。PCR扩增端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase promoter,hTERT)启动子的核心序列,构建针对EGFP基因的hTERT/U6嵌合启动子siRNA表达载体(EGFP-siRNA-PTZU6+1-U6/hTERT),正向和反向插入的hTERT启动子各1个,并将其转染至EGFP-7721细胞中,RT-PCR验证其效应。结果RT-PCR,Western blot结果表明两重组质粒siRNA-EGFP-PTZU6+1转染EGFP-7721细胞后EGFP基因的表达无统计学差异,但与对照组比较均显著抑制了EGFP基因(P<0.01)。而且,RT-PCR结果显示,反向插入的重组质粒EGFP-siRNA-PTZU6+1-U6/hTERT与对照组相比显著抑制了EGFP基因的表达(P<0.05)。结论构建的含hTERT/U6嵌合启动子的siRNA表达载体在肝癌细胞中具有功能活性,为探讨基因的靶向治疗奠定了基础。; 姜习新张鹏辉刘北忠涂植光杨毅刘靳波; 关键词：端粒酶逆转录酶启动子 SIRNA表达载体

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杨毅