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加热搅拌装置: 本实用新型涉及的加热搅拌装置，用于在溶质溶解于溶剂过程中进行加热和搅拌操作，其特征在于，包括：电加热器，用于加热由所述溶质和所述溶剂组成的混合物；搅拌组件，用于使所述溶质和所述溶剂均匀混合；以及支架，用于为所述搅拌组件提...; 王伟洁李红梅王慧卿侯堃; 文献传递

一种发酵培养基及用该培养基发酵生产尿苷磷酸化酶的方法: 本发明提供的一种发酵培养基，包含：NaCl (3~12g/L)，葡萄糖（10~25g/L），酵母膏（5~15g/L），蛋白胨（2~15g/L），K2HPO4.3H2<...; 李红梅陈宝珍王伟洁侯堃周思远刘阳; 文献传递

重组大肠杆菌产NAD激酶发酵条件的优化研究被引量：6: 2015年; 本研究将重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)/p ET30α(+)-NADK作为NAD激酶生产菌种,对其产酶发酵培养基及发酵条件进行优化。采用Placket-Burman(PB)设计先筛选出影响重组菌产NAD激酶的三个主要因素:葡萄糖浓度、Mg SO4浓度和诱导表达时间,试验结果表明,增加葡萄糖和Mg SO4的浓度及缩短诱导表达时间对产酶有利。根据中心组合实验设计(Central Composite Design,CCD)原理,利用PB设计确定的这三个显著影响因素,通过最陡爬坡实验逼近最大响应区域,挑选出实验范围内的最优点,以此作为响应面中心组合设计的中心点,用NAD激酶酶活作为响应值,使用Design Expert 8.0软件设计中心组合实验,通过对实验数据进行分析,得出最佳发酵培养基成分及发酵条件为:葡萄糖14.24 g/L、酵母粉8 g/L、胰蛋白胨8 g/L、Mg SO40.94 g/L、Na Cl 5g/L、NH4Cl 2 g/L、KH2PO42 g/L、K2HPO49 g/L,诱导表达时间8.34 h,接种量2%。在此最佳条件下,NAD激酶酶活实验验证值可达10.17 U/mg,与优化前相比提高了2.77倍。对诱导表达结束后的细胞上清液进行SDS-PAGE分析也证明优化取得了显著的效果。; 侯堃李红梅; 关键词：重组大肠杆菌 NAD激酶响应面设计

聚乙烯醇-明胶复合膜固定化重组大肠杆菌NAD激酶的研究被引量：1: 2017年; 为提高烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)激酶的稳定性,采用复合膜对NAD激酶进行固定化研究。选用聚乙烯醇(PVA)、聚乳酸(PLA)、海藻酸钠(SA)和明胶(GEL)膜材料固定化NAD激酶。通过单因素实验确定最佳固定化条件为:PVA∶GEL为4∶1,加酶量为0.6 mL,固定化时间为6h,固定化温度为35℃,此时酶活力回收率达到最高值84%。固定化酶酶学性质分析结果表明,与游离酶进行比较,固定化后NAD激酶的最适温度由50℃提高至55℃,最适pH由8.0降至7.0,NAD激酶的热稳定性和pH稳定性均得到显著提高,但固定化酶的亲和力降低。固定化NAD激酶重复利用6次后,酶活性依然可维持初始酶活性的75%以上,表明聚乙烯醇-明胶复合膜固定化酶具有良好的操作稳定性。; 袁飞飞李红梅侯堃; 关键词：NAD激酶固定化

嗜热脂肪地芽孢杆菌NAD激酶克隆表达及酶学性质研究被引量：6: 2014年; NAD激酶能催化NAD生成NADP。本研究采用PCR技术从嗜热脂肪地芽孢杆菌基因组中获得NAD激酶基因,以pET30a(+)为表达载体、E coli BL21(DE3)为宿主菌,实现其在大肠杆菌中异源表达,并进行酶学性质研究。结果显示,嗜热脂肪地芽孢杆菌中NAD激酶编码基因大小为816 bp,酶分子量大约为35 kD。酶学性质分析表明,来源于嗜热脂肪地芽孢杆菌的NAD激酶最适反应温度和pH分别为35℃、pH 7.5,在35℃中保温2 h后仍能保持80%左右的活性。Mn^(2+)、Ca^(2+)对该酶有较强的激活作用,在最适反应条件下该酶的比活力为4.43 U/mg。动力学性质分析结果显示NAD激酶对底物NAD催化的K_m和K_(max)分别为1.46 mmol/L和0.25μmol/(L·min)。NAD激酶在大肠杆菌的异源表达为以NAD为底物生物合成NADP提供了更多生物资源。; 侯堃李红梅侯立琪; 关键词：NAD激酶克隆表达酶学性质

双蒸水储水箱装置: 双蒸水储水箱装置包括主体支架、储水箱支架和可释放地固定在储水箱支架上的双蒸水储水箱。储水箱支架通过水平枢转轴与主体支架连接，使其相对于主体支架向上并向外枢转180度。当处于静止位置时：储水箱支架的外侧与主体支架的外侧对齐...; 侯堃薛芳陈宝珍李红梅; 文献传递

自溶超声波耦合法提取啤酒废酵母中β-1,3-D-葡聚糖被引量：7: 2014年; 采用自溶-超声波耦合法提取啤酒废酵母中β-1,3-D-葡聚糖。首先以自溶率为考察指标,将单因素和正交实验相结合,结果显示,pH=5.0条件下,质量分数5%NaCl和体积分数1.5%乙酸乙酯混合添加可以最大限度地促进酵母细胞的自溶,从而促进酵母细胞质壁分离。进而,采用超声波法从自溶后收集的细胞壁沉淀中提取β-1,3-D-葡聚糖,以质量分数2%NaOH作超声溶剂,利用Box-Behnken设计考察了超声功率、超声时间和超声次数对葡聚糖提取率的影响,确定最佳提取条件为:超声功率550 W,超声时间33 min,超声次数2次,在该条件下葡聚糖提取率达到50.5%,与纯超声波提取葡聚糖法相比提取率提高了2倍。; 李红梅王伟洁侯堃黄艳青高露姣; 关键词：啤酒废酵母生物工程

一种发酵培养基及用该培养基发酵生产尿苷磷酸化酶的方法: 本发明提供的一种发酵培养基，包含：NaCl (3~12g/L)，葡萄糖（10~25g/L），酵母膏（5~15g/L），蛋白胨（2~15g/L），K2HPO4.3H2<...; 王伟洁李红梅侯堃

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侯堃