马晓博
- 作品数:5 被引量:38H指数:4
- 供职机构:江南大学食品学院食品科学与技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 利用海藻酸钠固定化米糠制备γ-氨基丁酸的研究被引量:5
- 2009年
- 米糠是稻谷加工中的副产品,年产量很大但开发利用程度很低,其含有的谷氨酸脱羧酶(GAD)活力是植物中的佼佼者,该酶可以将谷氨酸转化为γ-氨基丁酸(GABA)。本研究中将米糠固定化以达到固定化其中GAD的目的,得到最佳固定化条件:米糠6.0%、海藻酸钠溶液浓度2.5%、硬化时间1h、CaCl2溶液浓度1.0%,此时固定化米糠GAD酶活力回收率达到48.94%。利用固定化米糠GAD制备的GABA制备液中GABA含量为3.06%,为植物法制备GABA提供又一种技术方法。
- 王筱婧王立马晓博姜启兴张晖
- 关键词:Γ-氨基丁酸谷氨酸脱羧酶米糠固定化酶海藻酸钠
- 牡丹花不同发育时期脂质过氧化代谢的相关性研究被引量:4
- 2008年
- 【目的】分离纯化米胚芽谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase,GAD),并对其酶学性质进行研究。【方法】通过(NH4)2SO4分级沉淀、DEAE-Sephrose FF离子交换色谱、Superdex 200凝胶过滤色谱和Glu SephroseCL 4B亲和色谱等分离纯化技术,对米胚芽GAD进行分离纯化。用体积排阻高效液相色谱测定米胚GAD的相对分子质量,SDS-PAGE测定其亚基的相对分子质量。测定米胚GAD的最适温度和pH,通过酶动力学试验测定其动力学常数(Km)和最大反应速度(Vmax),并测定KCl和MgSO4等化学物质对酶活性的影响。【结果】分离纯化得到了米胚GAD,其纯化倍数为65.7,比活达223.4 U/mg,酶活回收率为10.8%。米胚GAD的相对分子质量为78 ku,亚基相对分子质量为40 ku,说明米胚GAD是由2个相同亚基构成的二聚体。米胚GAD的最适反应温度为40℃,最适反应pH为5.6;米胚GAD的热稳定较差,80℃时酶几乎完全失活;米胚GAD在pH 4.5-8.0较为稳定,能保持88%以上的酶活。米胚GAD对谷氨酸Glu的Km为32.3 mmol/L,Vmax为1.159 mg/min;对磷酸吡哆醛(PLP)的Km为1.7μmol/L,Vmax为1.171 mg/min。K+和Ag2+对米胚GAD的活力有较大抑制,Mg^2+、Mn^2+、Al^3+和Li^2+等对活性影响不大,500μmol/L Ca^2+对米胚GAD有较强的激活作用。【结论】米胚GAD的性质与其他植物GAD存在差异。
- 吕莹果张晖马晓博姚惠源
- 关键词:米胚芽谷氨酸脱羧酶酶学性质分析
- 反相高效液相色谱法测定发芽糙米中γ-氨基丁酸的含量被引量:17
- 2008年
- 建立了一种测定发芽糙米中γ-氨基丁酸含量的反相高效液相色谱法。采用2,4-二硝基氟苯柱前衍生,色谱柱为Wa-ters Sunfire C18,梯度洗脱,检测波长为360 nm。在最适条件下,γ-氨基丁酸的线性检测范围为0.01~0.25 mg/ml,线性关系良好,回收率为99.28%~100.36%。该方法易于操作、稳定、灵敏、准确。用该方法测定发芽前后糙米中GABA的含量,结果显示:糙米中的γ-氨基丁酸由5.01 mg/100 g提高到35.03 mg/100 g。
- 孟祥勇张晖陶冠军吕莹果徐冬霞马晓博
- 关键词:反相高效液相色谱Γ-氨基丁酸发芽糙米
- 利用米糠谷氨酸脱羧酶富集γ-氨基丁酸的新研究被引量:9
- 2007年
- 通过一系列实验对传统的直接法与"提酶法"富集米糠γ-氨基丁酸(GABA)进行了比较,结果表明提酶法进一步提高了GABA的产率并且成本几乎没有增加。"提酶法"即采用米糠谷氨酸脱羧酶(GAD)粗酶液外加谷氨酸钠来富集GABA,产率达到3 789.1 mg/100 g米糠,在此条件下可进一步采用固定化酶的方法固定化GAD粗酶液中的GAD,从而不仅很大程度上提高GAD的利用率,更方便了后期GABA的纯化工作,适合工业化生产要求。
- 马晓博张晖
- 关键词:Γ-氨基丁酸谷氨酸脱羧酶米糠
- 固定化米糠对谷氨酸脱羧酶活性影响的研究被引量:3
- 2009年
- 米糠是稻谷加工中的副产品,年产量很大但开发利用程度很低,其含有的谷氨酸脱羧酶(GAD)活力是植物中的佼佼者,该酶可以将谷氨酸转化为γ-氨基丁酸(GABA)。研究发现,可以将米糠固定化以达到固定化其中GAD的目的。本文研究了固定化后的米糠中GAD的酶学性质,研究表明,经海藻酸钠固定化的米糠GAD的最适温度由40℃左右移至45℃左右,其它性质没有发生变化,此时固定化米糠GAD酶活力回收率达到51.00%。利用固定化米糠GAD制备的GABA制备液中GABA含量为3.06%,为植物法制备GABA提供又一种技术方法。
- 王筱婧王立马晓博姜启兴张晖
- 关键词:Γ-氨基丁酸谷氨酸脱羧酶米糠固定化酶海藻酸钠