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斑马鱼外源基因acta1-AcGFP重组及其最佳注射浓度初探被引量：1: 2009年; 肌动蛋白纤维(actin filament)又称微丝(microfilament,MF),由肌动蛋白(actin)组成,是骨骼肌的重要组成部分。通过PCR从斑马鱼基因组DNA中分离得到大小为2 019 bp的α肌动蛋白1(α-actin1)启动子所在区域片段。序列分析表明,该片段序列与NCBI公布的α-actin1基因5′侧翼区相应序列的相似性为98.7%,并且含有多个MEF2,E-box等对肌肉表达起调控作用的顺式元件以及在转录中起重要作用的TATA-box。将该启动子片段与绿色荧光蛋白基因(AcGFP)重组,构建肌动蛋白特异性表达载体。采用显微注射法,将线性化表达载体注入斑马鱼受精卵中,获得转绿色荧光蛋白基因斑马鱼,平均表达率最高为16.5%。并初步确定400 ng/μl为外源基因(acta1-AcGFP)的最佳注射浓度。通过观察发现,AcGFP基因主要在骨骼肌中表达,且表达量随仔鱼肌肉的发育呈增长趋势。证明了分离得到的α-actin1启动子所在区域片段具有有效的驱动功能,为进一步开展转基因观赏鱼的研究与开发提供了依据。; 潘鸿捷刘红蔡生力张俊叶斐菲王豪杰; 关键词：肌动蛋白启动子转基因绿色荧光蛋白基因斑马鱼

稀有鮈鲫β-肌动蛋白启动子的克隆及其驱动活性的初步检测被引量：4: 2010年; 稀有鮈鲫是一种新型的模式实验鱼,具有利用转基因技术培育开发成为观赏性鱼类的潜在可能。本实验采用PCR方法,从稀有鮈鲫基因组DNA中分离得到大小为1584bp的β肌动蛋白(β-actin)基因片段。序列分析表明,该片段包括长为1507bp的启动调控区和77bp的部分转录区序列。启动调控区包括一段长为109bpβ-actin基因上游调控序列,不翻译的外显子1和内含子1。上游调控序列中含有TATAbox,CAATbox和CArGbox等与转录活性密切相关的作用元件,并且在稀有鮈鲫β-actin基因第一个内含子中也含有1个CArG调控元件。将该启动子片段克隆到绿色荧光表达载体(pAcGFP1-1)上,显微注射入稀有鮈鲫的受精卵中,通过荧光显微镜能观察到绿色荧光蛋白的表达。本实验成功分离了具有驱动活性的稀有鮈鲫β-actin基因启动子。; 叶斐菲刘红蔡生力王豪杰李媛媛; 关键词：Β-肌动蛋白启动子转基因绿色荧光蛋白

4个不同世代凡纳滨对虾群体AFLP遗传多样性分析被引量：5: 2010年; 利用AFLP(amplified fragment length polymorphism)技术对4个不同世代的凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)群体进行遗传分析,探讨亲本、F1、F2和Fn4个世代群体间的遗传差异。选取10对AFLP引物组合对4个世代凡纳滨对虾群体共80尾个体进行比较分析,共扩增出483个位点,其中348个为多态位点;4个群体的多态位点比例为:61.90%、49.28%、50.52%、46.38%;4个群体的Shannon多样性指数分别为:0.3134、0.2621、0.2594、0.2262;结果表明亲本与F1,F2与Fn相互间遗传距离更为紧密。通过对4个不同世代群体的遗传多样性研究,为下一步进行杂交选育提供理论支持。; 王豪杰蔡生力叶斐菲刘红; 关键词：凡纳滨对虾 AFLP

稀有(鮈)鲫β-肌动蛋白启动子的克隆及序列分析: 稀有鮈鲫又名金白娘、墨线鱼，属鲤形目，鲤科，鮈鲫属，是我国特有的一种小型鲤科鱼类。转基因技术是改变动物遗传性状，培育动物新品系的有效途径，且在观赏鱼培育和市场开发上具有较好的实用价值。转基因重组表达载体构建的重要工作是强...; 叶斐菲刘红蔡生力王豪杰李媛媛; 关键词：基因克隆肌动蛋白基因启动子

凡纳滨对虾转录间隔区Ⅰ(ITS-1)序列及其二级结构的分析: 对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)核糖体转录间隔区Ⅰ进行了克隆测序,并对ITS-1序列进行了分析,结果显示,克隆的凡纳滨对虾ITS-1序列长度为614 bp,其中碱基含量为A：15.64％、C：33...; 王豪杰蔡生力刘红叶斐菲钟立强; 关键词：凡纳滨对虾微卫星

不同化学试剂对稀有(鱼句)鲫受精卵脱粘效果的比较: 介绍了实验室养殖条件下对稀有约鲫所产粘性卵的化学脱粘方法.使用4种溶液：(1)1.5％ Na2SO3；(2)1.5％ Na2SO3 +0.2％木瓜酶；(3)1.5％L-半胱氨酸-HCL+0.2％木瓜酶；(4)1.0％ N...; 叶斐菲蔡生力王豪杰李媛媛; 关键词：受精卵

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王豪杰