戴景
- 作品数：1 被引量：16H指数：1
- 供职机构：海南大学农学院苦丁茶研究所更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 利用单因子和正交设计双重实验方法优化广藿香ISSR-PCR实验体系被引量：16
- 2011年
- 为了建立广霍香优化的ISSR-PCR反应体系,首先通过单因子试验选定其各影响因子比较适宜的浓度范围,再利用正交试验设计的方法,对影响广藿香ISSR-PCR反应的5种因素4水平进行优化试验。结果表明:广藿香ISSR-PCR的优化反应体系最终确定为:在25μL反应体系中,含DNA模板40 ng,Mg2+浓度为2.5 mmol.L-1,引物浓度为0.3μmol.L-1,TaqDNA聚合酶用量为1.5 U,dNTPs浓度为150μmol.L-1。PCR扩增程序为:94℃预变性5 min,然后按94℃变性45 s,52.7℃退火45 s,72℃延伸90 s,进行40个循环,最后72℃延伸7 min,4℃保存。
- 曹嵩晓李娟玲刘国民王艺戴景
- 关键词：广藿香ISSR-PCR单因子试验正交设计
