周华成
- 作品数：3 被引量：18H指数：2
- 供职机构：大连工业大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 丙酸杆菌基因敲除体系的构建及其应用
- 2013年
- 目的丙酸杆菌基因敲除体系的构建及其验证。方法利用PCR技术扩增丙酸杆菌hemE基因上、下游约500 bp左右片段,构建由上下游同源臂及hygB抗性基因组成的打靶质粒pPK705-arms-hygB。将打靶质粒转入丙酸杆菌感受态细胞,利用同源重组技术定向敲除hemE基因,并通过连续传代培养,消除外源质粒。最后,利用PCR技术验证丙酸杆菌染色体和打靶质粒发生同源重组。结果成功敲除了丙酸杆菌hemE基因。结论打靶质粒pPK705-arms-hygB能够与宿主基因组DNA发生重组,对稳定地改善其整个代谢途径的研究奠定了方法学基础。
- 郭敏利朴永哲王世全黄玮周华成杨洪泽唐丽娜
- 关键词：基因敲除
- 大麦发芽过程中蛋白质组的变化研究被引量：15
- 2013年
- 通过双向电泳技术监测大麦发芽过程中水溶蛋白质组的变化,明确大麦发芽过程中蛋白质组的变化规律,为麦芽制造提供一定理论依据。以澳麦"schooner"为研究对象,提取其水溶蛋白进行双向电泳分析,结合分析软件监测大麦发芽过程中蛋白质组的变化。结果显示,本实验检测出大麦种子中大约有804种蛋白质,发芽过程中有424种蛋白质未发生变化,379种蛋白质降解消失或浓度降低,另有77种新的蛋白质产生。结果表明,进一步证实浸麦阶段主要是蛋白质的降解过程;发芽前期蛋白质的降解和合成转化较为缓和,发芽中期(48～72h)蛋白质的降解最为旺盛;发芽后期蛋白质的变化基本趋于平衡。
- 刘宝祥朴永哲翟明昌董亮郭敏利周华成赵长新
- 关键词：大麦发芽蛋白质组双向电泳
- 剩余污泥生态稳定化过程中细菌群落的多样性分析被引量：3
- 2012年
- 为了描述污泥生态稳定化过程中微生物多样性的变化趋势,应用变形梯度凝胶电泳技术(PCR-DGGE)分析了不同时期、不同取样位置的细菌群落变化。通过对图谱的聚类分析了不同样品的相似度。计算得出香农-威纳(Shannon-Wiener)指数分别为1.93、1.89、1.80、1.98、1.91、1.83、2.41、2.38、2.32,均度指数(Pielou)分别为0.62、0.58、0.65、0.62、0.67、0.68、0.74、0.78、0.72,其从3月到9月均在上升,即稳定化过程中生物多样性及均匀度都在提高。利用测序后得到的序列进行亲缘性比对,并结合优势种属的变化分析污泥样品细菌群落的演替。结果表明,污泥不同位置的微生物群落相似度较高,不同时期的生物群落有一定的差异,推测污泥中生物种群与优势种属主要随生态稳定化不同时期而改变。序列分析以及亲缘性分析表明,优势菌株主要为放线菌门和变形菌门,有5种放线菌、5种变形菌和2种古细菌共12种属。其中拜叶林克氏菌和红球菌上升有利于对有机质的降解转化,假诺卡氏菌等致病菌的减少说明生态稳定化具有良好的作用。生态稳定化可能对致病菌的降低以及有机质的转化等具有一定的作用。
- 曹阳朴永哲崔玉波沈海萍郭敏丽周华成
- 关键词：环境工程学稳定化生物多样性变性梯度凝胶电泳
