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张子飞
作品数:
1
被引量:0
H指数:0
供职机构:
中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所合成生物学重点实验室
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发文基金:
中国科学院知识创新工程
国家自然科学基金
国家高技术研究发展计划
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相关领域:
生物学
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合作作者
陈威华
中国科学院上海生命科学研究院植...
覃重军
中国科学院上海生命科学研究院植...
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覃重军
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陈威华
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张子飞
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微生物学报
年份
1篇
2010
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高温链霉菌质粒pTSC2的测序分析和滚环复制方式的鉴定
2010年
从猪粪堆肥中分离到一株编号为X3-3的可以在50℃高温生长的链霉菌菌株,该菌株含有一个约7kb的环型质粒pTSC2。【目的】克隆、测序和分析pTSC2,以及鉴定质粒的复制方式。【方法】利用分段克隆和引物延伸获得pTSC2的全序列,利用多序列比对寻找复制元件rep、dso和sso,利用中性转移和Southern杂交检测复制中间体。【结果】克隆和测序获得了全长为7516bp的pTSC2序列,预测编码8种蛋白,其中4种蛋白与链霉菌滚环复制的质粒pIJ101中负责复制和接合转移的蛋白非常相似。pTSC2的复制元件rep、dso和sso也与pIJ101的相似。克隆、转化变铅青链霉菌ZX7以及高温链霉菌2C证明了rep和dso为复制所必需元件。Southern杂交检测到pTSC2复制过程中积累了大量的单链DNA。【结论】高温链霉菌质粒pTSC2以滚环方式进行复制。这是首次在高温链霉菌中克隆和测序质粒,以及鉴定其复制方式。
张子飞
陈威华
覃重军
关键词:
质粒
测序
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