吴坚
- 作品数：6 被引量：0H指数：0
- 供职机构：湖南师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 利用整体胚胎原位杂交技术分析pop3对斑马鱼心脏环化的影响
- 心脏环化是心脏发育过程的重要阶段,心脏环化正常与否和心脏功能密切相关,其过程涉及到一系列相关基因在时空上的精确表达。本实验室前期研究发现pop3在斑马鱼的心脏和肌肉中都有高水平表达,通过morpholinos反义核苷酸敲...
- 吴坚
- 关键词：斑马鱼原位杂交
- 斑马鱼ANF基因的克隆及多克隆抗体的制备
- 2011年
- 心房钠尿肽ANF是钠尿肽家族中的一员,是心肌细胞分泌的一种循环激素,主要在心房组织分泌。生物信息学分析表明,斑马鱼ANF基因开放阅读框全长321bp,编码106个氨基酸,PCR扩增获得斑马鱼ANF基因全长。将所得的PCR片段插入原核表达载体pGEX-4T-1中,并将重组质粒(pGEX-4T-1-ANF)转化大肠杆菌BL21。通过IPTG诱导表达GST-ANF融合蛋白,经GST亲和层析法纯化后,免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗体,Western blotting分析表明,制备的抗体具有良好的高效价性和特异性。
- 李竞超吴坚梁艳莫小阳吴秀山
- 关键词：融合蛋白多克隆抗体
- 斑马鱼charon基因的克隆、抗体制备及分析
- 2011年
- 斑马鱼charon基因位于1号染色体上,其成熟肽编码区含有731bp,编码243个氨基酸。charon基因编码Cerberus/Dan家族的一种分泌因子,它与心脏的左右不对称发育有关。为进一步研究charon在心脏左右不对称发育中的功能,以斑马鱼为动物模型,利用RT-PCR的方法成功克隆了斑马鱼charon基因片段,并将其进行原核表达,制备了charon多克隆抗体。通过western blotting对抗体进行分析,结果表明:实验获得了效价较高、特异性较好的charon多克隆抗体,而且charon在斑马鱼中表达较为广泛,在心脏、肌肉、眼睛等组织表达尤其明显。
- 吴坚王玲戴悦吴秀山王跃群
- 关键词：CHARON融合蛋白斑马鱼原核表达多克隆抗体
- 心脏和肌肉组织特异表达基因HDGC通过HDGC-TP2-GATA4信号途径调控心脏的发育
- 我们利用斑马鱼模型深入研究了心脏发育候选基因HDGC的功能。自制了人和斑马鱼HDGC抗体,通过Western blotting、免疫组化及整胚原位杂交结果表明,HDGC在斑马鱼胚胎发育的各时期均有表达,其中在心脏的心室和...
- 罗娜王琨吴坚李发祥黄婷陈婷芳邓云吴秀山袁婺洲
- 文献传递
- 利用斑马鱼模型研究心脏组织高表达基因HDGC3在心脏发育中的功能
- 我们以大规模筛选心脏发育候选基因的研究结果为基础鉴定出一个在心脏高表达的基因HDGC3。HDGC3基因在脊椎动物中高度进化保守,编码35KD蛋白,生物信息学分析表明,HDGC3编码蛋白含有三个跨膜结构域和一个cNMP结合...
- 罗娜李发祥叶湘漓陈婷芳黄婷吴坚王琨吴秀山邓云
- 文献传递
- 利用斑马鱼模型研究心脏组织高表达基因HDGC3在心脏发育中的功能
- 罗娜李发祥叶湘漓陈婷芳黄婷吴坚王琨吴秀山邓云
