聂晓华
- 作品数:11 被引量:17H指数:3
- 供职机构:北京农学院动物科学技术学院更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金北京市教委科技计划面上项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 猪血源树突状细胞诱导培养与鉴定被引量:2
- 2011年
- 为规范DCs诱导培养和鉴定的方法,研究相关病毒致病机制、制定相应的治疗与预防措施奠定技术平台。分离猪外周血单个核细胞(PBMCs),贴壁细胞经一定浓度GM-CSF和IL-4诱导,不同时间观察形态变化,7天后收集所诱导的细胞,经光镜、流式细胞术及激光共聚焦显微镜鉴定其形态、表面标志物CD1a/SWC3a;利用双色流式细胞术检测DCMHC-II分子和CD80/86表达情况。试验结果显示,所诱导的细胞具有典型树突状形态;其表面CD1a/SWC3a双阳性率达到90.1%,MHC-II/CD80/86分子双阳性率达98.3%;激光共聚焦显微镜观察细胞呈集落状,细胞表面CD1a/SWC3a双阳性,表明已经成功诱导出猪血源DC,并获得诱导的标准程序,为研究以DC为靶细胞的猪病毒性疾病免疫致病机理奠定基础。
- 聂晓华遇奇李建东李焕荣崔德凤
- 细胞连接型屎肠球菌素Enterocin E9特性的研究
- 本研究主要通过琼脂扩散法首次发现肠球菌上清液和菌体都含有Enterocin E9,分析了Enterocin E9的生长特性、热稳定性、酸碱耐受性等生物学特性以及吐温-80的浓度和储藏条件对活性的影响,为Enterocin...
- 周波聂晓华崔德凤王雪亭白燕刘凤华
- 关键词:家畜饲养琼脂扩散法
- 屎肠球菌素E9的产生和特性研究被引量:7
- 2011年
- 用琼脂扩散法分别检测了不同培养时间的屎肠球菌E9无细胞上清液和连接在菌体上的Enterocin E9活性,同时分析了Enterocin E9的生物学特性。结果显示:含Enterocin E9的上清液和菌体都具有抑菌活性,活性大小存在浓度依赖性。在一定时间范围内,其上清液和菌体的活性都随着培养时间的增加而逐渐升高。取上清液进行稳定性分析,结果发现Enterocin E9有很好耐热和耐酸碱性,经121℃处理20 min后其活性仍大部分保留,在pH2~12的范围内37℃下处理4 h仍保持较高活性;不同浓度的吐温-80对其活性无明显影响;室温放置7周后,活性无明显变化。上述实验说明屎肠球菌E9产生的细菌素不仅分泌到上清液中,同时还有较大部分与菌体结合。Enterocin E9稳定性良好,储藏条件简单,具有在畜牧业中应用的潜能。
- 周波刘凤华崔德凤聂晓华王雪亭白燕
- 关键词:屎肠球菌ENTEROCIN抑菌活性
- 猪圆环病毒2型感染猪皮肤源树突状细胞炎性反应能力的变化被引量:4
- 2009年
- 用PCV2 B1株经鼻腔接种40日龄SPF仔猪,于接种后3、7、14 d宰杀,收集皮肤源树突状细胞(DC)。利用实时荧光定量PCR技术对感染仔猪皮肤源DC的IL-10、TNF-α、IFN-αI、L-8、趋化因子受体1(CCR1)、CCR5在mRNA转录水平的变化进行定量分析。结果表明,IFN-α在接种后3 d(3DPI)显著下调(P<0.05),TNF-α、IL-10在7DPI时显著上调(P<0.05);趋化因子IL-8在3、7、14 DPI时均下调,差异接近显著;MCP-1在感染后3、14DPI下调,7DPI均上调,但不显著;MIP-1β在3、7DPI明显上调,14DPI恢复正常;趋化因子受体CCR1、CCR5在3、7和14DPI均上调,且7DPI显著上调(P<0.05)。以上结果表明PCV2在感染早期可抑制DC炎性反应的能力,免疫应答失调,影响了动物机体的细胞和体液免疫功能的发挥。
- 王振生聂晓华李焕荣孙英健隋丽华崔德凤
- 关键词:猪圆环病毒2型炎性因子趋化因子趋化因子受体
- TGEV S基因A和B/C抗原位点间接ELISA方法的建立及血清学的初步调查
- 为建立猪传染性胃肠炎病毒与猪呼吸道冠状病毒的鉴别诊断方法,分别利用构建的基因工程重组菌表达了TGEVS基因A和B/C位点蛋白。以纯化的蛋白作为包被原分别建立了间接ELISA方法,确定了方法的最佳反应条件,并用所建立的方法...
- 聂晓华李焕荣沈红高冉王鑫崔德凤
- 关键词:猪传染性胃肠炎病毒S基因间接ELISA方法
- 文献传递
- 细胞连接型屎肠球菌素Enterocin E9特性的研究
- 引言/目的近几年来,有很多关于来自食品的肠球菌产生细菌素的报道,而从动物胃肠道分离到的肠球菌产生细菌素的报道却很少。肠球菌E9由本实验室分离自健康猪胃肠道,经生化及16sDNA鉴定属于屎肠球菌(Enterococcus ...
- 周波聂晓华崔德凤王雪亭白燕刘凤华
- 猪源肠道菌素Enterocins A的产生特性及其分离纯化
- 前期研究发现,从猪肠道中分离得到的多株肠球菌能够产生肠道菌素(EnterocinsA),它是一种能够抑制多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的肠道菌素蛋白。为了探究影响Enterocins A活性的因素及Enterocins ...
- 周波杨桂梅聂晓华崔德凤刘凤华
- 关键词:肠道菌素分离纯化硫酸铵沉淀
- PCV2感染猪皮肤源树突状细胞内源性抗原加工提呈相关分子转录水平的变化
- 2011年
- 用猪圆环病毒2型(PCV2)感染40日龄健康长白仔猪,于感染后3、7、14、21、35天宰杀,收集皮肤源树突状细胞(DC)。利用实时荧光定量PCR技术对感染仔猪皮肤源DC内源性抗原加工提呈相关分子(LMP7,UBP,MHC-I,calreticulin)mRNA水平的变化进行定量分析。结果显示,LMP7转录水平在感染后3天显著下调(P<0.05),UBP转录水平始终上调,其中在21天和35天显著上调(P<0.05),MHC-I转录水平在7天显著下调(P<0.05),calreticulin转录水平虽有所上调,但差异不明显。以上结果表明,PCV2在感染早期可抑制猪皮肤源DC内源性抗原加工提呈能力。
- 李建东李焕荣聂晓华遇奇崔德凤
- 关键词:猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR
- 猪传染性胃肠炎病毒S基因A位点蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
- 2011年
- 猪传染性胃肠炎(TGE)是由传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起的高度接触传染性疾病,以仔猪呕吐、严重腹泻、脱水和高死亡率为临床特征。该病毒主要编码纤突蛋白(S)、膜结合蛋白(M)、核蛋白(N)和小膜蛋白(s M)4种结构蛋白[1-2]。其中S蛋白是惟一能诱导机体产生中和抗体的结构蛋白[3]。
- 聂晓华李建东李焕荣崔德凤张莉
- 关键词:猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白单克隆抗体S基因
- PCV2感染猪皮肤源树突状细胞内源性抗原加工提呈相关分子转录水平的变化(英文)被引量:1
- 2012年
- [目的]该研究旨在探讨PCV2感染猪皮肤源树突状细胞内源性抗原加工提呈相关分子转录水平的变化。[方法]用猪圆环病毒2型(PCV2)感染40日龄健康长白仔猪,于感染后3、7、14、21、35天宰杀,收集皮肤源树突状细胞(DCs)。利用实时荧光定量PCR技术对感染仔猪皮肤源DC内源性抗原加工提呈相关分子(LMP7,UBP,MHC-I,calreticulin)mRNA水平的变化进行定量分析。[结果]LMP7转录水平在感染后3天显著下调(P<0.05),UBP转录水平始终上调,其中在21天和35天显著上调(P<0.05),MHC-I转录水平在7天显著下调(P<0.05),calreticulin转录水平虽有所上调,但差异不明显。[结论]以上结果表明,PCV2在感染早期可抑制猪皮肤源DC内源性抗原加工提呈能力。
- 李建东李焕荣聂晓华遇奇崔德凤
- 关键词:猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR