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张莉君
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
供职机构:
扬州大学医学院
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发文基金:
江苏省基础研究计划
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
贺丽
扬州大学医学院
焦红梅
扬州大学医学院
杜庆辉
扬州大学医学院
冒艳丽
扬州大学医学院
李国才
扬州大学医学院
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E.COLI
机构
1篇
扬州大学
作者
1篇
刘双喜
1篇
李国才
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冒艳丽
1篇
杜庆辉
1篇
焦红梅
1篇
贺丽
1篇
张莉君
传媒
1篇
生物技术
年份
1篇
2012
共
1
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E.coli M15碱性磷酸酶的表达、纯化及活性分析
被引量:2
2012年
目的:克隆、表达并纯化大肠杆菌M15碱性磷酸酶(EAP)成熟肽(phoA),分析其活性。方法:采用PCR技术从M15基因组DNA中扩增出phoA编码基因;构建其原核表达载体pCold-TF-EAP;转入E.coli BL21(DE3)进行表达;IMAC Ni-NTA柱层析法纯化重组蛋白;重组蛋白与底物对硝基苯磷酸二钠显色反应分析其活性。结果:克隆得到了序列约1 400 bp phoA编码基因,原核表达了分子量约为100 kDa的融合重组EAP(rEAP),纯化获得的rEAP具有催化磷酸单酯的活性,有效反应温度范围大,在27℃~67℃都具有较高的催化活性,在pH 7.5~8.0间催化活性最高。结论:克隆了可正确表达EAP的phoA编码基因,为EAP的工业化生产及应用提供了生物材料。
杜庆辉
贺丽
刘双喜
张莉君
冒艳丽
朱小平
焦红梅
李国才
关键词:
碱性磷酸酶
活性鉴定
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