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C型产气荚膜梭菌致病机理研究进展被引量：7: 2016年; C型产气荚膜梭菌能够引起人类和一些动物的坏死性肠炎。该菌能产生α外毒素和β外毒素,大部分该菌菌株也能分泌出产气梭菌细胞溶素O(PFO)和TpeL。试验证明β外毒素是C型产气荚膜梭菌的主要致病毒素。在兔子肠襻和小鼠模型试验中发现,通过细胞中同源基因C型产气荚膜梭菌β毒素敲除基因突变株而导致该菌株失去毒力。当野生型β毒素基因补充这些突变体时毒素的活力将会复活。大多数C型产气荚膜梭菌产生的所有毒素(除TpeL外)都易与肠癌(Caco-2)细胞紧密结合并发生反应,比它在体外生长更加迅速。VirS/virR双组分调节系统(TCRS)被证明是在Coca-2细胞中导致β毒素和PFO产生快速上调。当virR基因被抑制时,pfoA和β毒素基因的表达也会受阻,这种系统是可逆的,virR表达时会恢复。通过β毒素作用于动物模型的试验研究,来寻找有效的预防措施。; 李凡飞张云李强赵泽慧何小丽许立华; 关键词：C型产气荚膜梭菌 Β毒素致病机制坏死性肠炎; 全文增补中

伤寒沙门菌LeuO调节蛋白研究进展: 2016年; LeuO是伤寒沙门菌复杂调控网络的一个全局转录调节蛋白,其调控伤寒沙门菌许多参与生物过程的基因表达,尤其是可以调控帮助菌体在严苛环境下生存的基因。作为H-NS的备份LeuO根据不同的浓度作为活化剂和抑制剂差异性调节基因表达。LeuO还可诱导孔蛋白的表达,孔蛋白是一种良好的免疫原,当作为疫苗接种动物,刺激机体免疫系统发生免疫应答,产生特异性免疫力。论文重点围绕LeuO作为调节蛋白的调节机制和在免疫学以及其他相关最新研究成果进行综述,以期为该类研究的开展提供参考。; 赵泽慧李强何小丽李凡飞许立华; 关键词：伤寒沙门菌孔蛋白

宁夏地区奶牛场牛传染性鼻气管炎的血清学调查被引量：10: 2016年; 为了了解牛传染性鼻气管炎（IBR）在宁夏地区成年奶牛群中的流行情况,课题组针对宁夏地区18个规模化奶牛场的成年牛群进行随机采血,共采集470份,通过酶联免疫吸附试验进行牛传染性鼻气管炎的血清学调查。结果显示：存在338头牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）抗体阳性牛,场群阳性率为100%,不同场群之间阳性率存在差异,从13.3%~100%不等,平均阳性率达到71.9%,表明牛传染性鼻气管炎已在宁夏地区广泛流行。此调查结果为宁夏地区奶牛传染性鼻气管炎的流行病学研究提供重要信息,为防控牛传染性鼻气管炎提供科学依据。; 李永琴赵世媛牛耀祖何小丽李凡飞温万许立华; 关键词：牛传染性鼻气管炎奶牛酶联免疫吸附试验血清学调查

衣原体毒力因子研究进展被引量：2: 2018年; 衣原体(Chlamydia)是一类专性细胞内寄生、具有独特的双相型发育周期的原核微生物,对人和多种畜禽有致病性。研究表明,衣原体的致病性是其毒力因子与宿主细胞的相互作用导致。论文通过对国内外许多学者关于衣原体致病机制和毒力因子的研究进行总结梳理,阐述主要外膜蛋白(MOMP)、多形态膜蛋白(Pmps)、Ⅲ型分泌系统(T3SS)、脂多糖(LPS)、热休克蛋白(HSP)、质粒和蛋白酶样活性因子(CPAF)在衣原体的致病性方面发挥的主要作用。; 张凯李凡飞何小丽王文佳程成张超许立华; 关键词：衣原体毒力因子

基于PCR方法的牛分枝杆菌分子检测技术研究进展被引量：5: 2018年; 世界卫生组织（Word Health Organization,WHO）已将牛结核病划入了7大重要的人兽共患病。结核病是一种人兽共患的慢性消耗性传染病,潜伏期较长。牛分枝杆菌（Mycobactrium bovis）是牛结核病的主要致病病原体,可以感染牛以及包括人在内的大部分哺乳动物^[1],能够在环境中存活数月至1年。由于动物全球化和密集的贸易牲,结核病已经严重威胁了世界公共卫生。; 李凡飞何小丽程成王文佳张凯许立华; 关键词：牛分枝杆菌 PCR 牛结核病

国内外牛传染性鼻气管炎的流行现状及防控措施的研究进展被引量：10: 2018年; 牛传染性鼻气管炎被OIE列为二类疫病,是一种急性、热性、接触性传染病。近年来,随着我国奶牛业的快速发展,规模化、集约化程度不断提升,IBR在我国广泛流行,给养牛业造成了巨大的经济损失。本文就国内外IBR的流行现状及防控措施作以综述,以期能为该病的防控提供依据,从而促进我国奶牛养殖业的健康发展。; 何小丽李凡飞张凯程成王文佳许立华; 关键词：牛传染性鼻气管炎流行病学

鼠伤寒沙门氏菌致病机理的研究进展被引量：9: 2017年; 鼠伤寒沙门氏菌是人和动物肠道主要病原菌之一。食入该病原菌污染的食物和水可以引起人和动物胃肠道疾病。菌体首先入侵肠上皮细胞,然后被巨噬细胞吞噬,最后全身扩散感染。鼠伤寒沙门氏菌之所以可以在宿主体内生存、繁殖、扩散是因为该菌拥有很多毒力因子的协助。鼠伤寒沙门氏菌的主要毒力基因存在于毒力岛上(SPIs)。目前,鼠伤寒沙门氏菌已有五个毒力岛研究得比较清楚。鼠伤寒沙门氏菌的其他毒力基因或毒力因子如p SLT毒力质粒、黏附素、鞭毛和生物膜也有助于其在宿主体内生存和繁殖。这些毒力因子在沙门氏菌的不同感染阶段发挥不同的作用。文章旨在对鼠伤寒沙门氏菌毒力基因和毒力因子的致病机理研究进展进行综述。; 赵泽慧李强何小丽李凡飞许立华; 关键词：鼠伤寒沙门氏菌致病机理毒力基因毒力因子

宁夏地区奶牛病毒性腹泻及牛传染性鼻气管炎的流行病学调查被引量：20: 2016年; 为了解宁夏地区奶牛的病毒性腹泻和传染性鼻气管炎的流行情况,本研究对宁夏不同地区的奶牛采取了135份耳组织和376份血清,分别对牛病毒性腹泻病毒抗原及牛传染性鼻气管炎病毒抗体进行了检测。结果显示,牛病毒性腹泻病毒抗原阳性率最高为0.5%,平均阳性率为0.01%;牛传染性鼻气管炎病毒抗体阳性率最高为100%,平均阳性率为85.1%。证实了宁夏地区已经存在着较为严重的牛病毒性腹泻病毒及牛传染性鼻气管炎病毒的感染。牛病毒性腹泻以及牛传染性鼻气管炎的流行病学调查为我区制定出科学有效的综合防控措施及促进地区奶业健康可持续发展提供依据。; 何小丽赵世媛李永琴李强赵泽慧李凡飞许立华; 关键词：牛病毒性腹泻牛传染性鼻气管炎流行病学

cGAS介导牛分枝杆菌诱导小鼠髓源树突状细胞成熟被引量：2: 2017年; 旨在深入研究小鼠髓源树突状细胞(BMDC)感染牛分枝杆菌(M.bovis)后环磷酸鸟苷-磷酸腺苷合酶(cGAS)的调控作用。通过体外诱导C57BL/6骨髓细胞分化为树突状细胞,建立牛分枝杆菌感染模型,运用siRNA技术沉默cGAS基因的表达,分别设置对照组、感染组、沉默组。通过流式细胞仪检测BMDC表型变化,Western blot和免疫荧光技术检测cGAS信号通路中STING、TBK1、p-TBK1及IRF3的表达情况,ELISA检测细胞上清液中细胞因子分泌水平。结果表明,牛分枝杆菌可刺激BMDC引起细胞表面标志物CD86、CD80、CD40、MHC-Ⅱ表达升高,相关细胞因子IFN-β、TNF-α、IL-12p70、IL-6分泌量提高,BMDC的抗原提呈能力增强。同时cGAS信号通路被激活,下游STING、p-TBK1、IRF3蛋白活化,而沉默cGAS基因后相关指标均显著下调。这表明牛分枝杆菌感染BMDC可激活cGAS信号通路,且cGAS有助于BMDC的成熟和活化。; 李强刘春法何小丽李凡飞魏凡华赵德明周向梅许立华; 关键词：牛分枝杆菌细胞因子

牛传染性鼻气管炎病毒部分gB蛋白的原核表达及抗原性分析被引量：1: 2019年; 为对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)gB基因进行原核表达,并对表达产物进行抗原性分析,利用笔者所在实验室已构建好的gB-BL21重组阳性菌落,进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并对培养及诱导表达条件(IPTG最佳浓度、作用时间)等影响表达的因素进行优化,然后将表达的gB重组蛋白进行亲和层析纯化。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明,gB蛋白在大肠杆菌中高效表达,表达蛋白的相对分子量约为32.4ku,与预期的蛋白大小一致。经BCA(聚氰基丙烯酸正丁酯)蛋白含量测定试剂盒测定,gB重组蛋白浓度为1.84mg/mL。Western Blot结果显示,纯化后的gB重组蛋白能被标准IBR阳性血清识别,说明表达的目的蛋白具有良好的反应原性,可作为IBRV检测的特异性抗原。试验为建立牛传染性鼻气管炎诊断方法及研究gB蛋白的功能特性提供了材料和技术理论支持。; 何小丽李凡飞王文佳张凯程成许立华; 关键词：牛传染性鼻气管炎原核表达纯化抗原性分析

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李凡飞

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