王艺璇
- 作品数：10 被引量：49H指数：4
- 供职机构：成都中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金成都市科技计划项目四川省中医管理局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 虫草类药材中多球壳菌素含量的测定研究被引量：1
- 2018年
- 目的:本研究旨在筛选出我国常见虫草中ISP-1含量高的种类,为下一步生产ISP-1提供优质菌种。方法:首次系统地使用HPLC对冬虫夏草、凉山虫草、蛹虫草、古尼虫草和亚香棒虫草中的ISP-1含量进行测定。结果:发现五种虫草中都含有ISP-1,蛹虫草中含量高达0. 7933 mg/g,远高于冬虫夏草。结论:从测定结果来看,蛹虫草、凉山虫草、亚香棒虫草中ISP-1含量高于冬虫夏草。可以为下一步生产ISP-1选择优质菌种提供基础。
- 王艺璇曹秀君万德光国锦琳
- 关键词：虫草多球壳菌素
- 双向电泳技术筛选鉴定冬虫夏草中指标性蛋白质研究被引量：5
- 2017年
- 对名贵中药材冬虫夏草及其伪品建立稳定可靠的双向电泳鉴定方法。正品冬虫夏草中共同表达的蛋白质斑点为88个,伪品稳定差异表达的蛋白质斑点为21个,提示可作为下一步冬虫夏草鉴定的指标性组分。进一步质谱分析与NCBI数据库比对表明:6种蛋白仅来自于菌数据库,9种蛋白仅来自于昆虫数据库,12种蛋白仅来自于全库,3种蛋白昆虫和菌的数据库均能检索,1种蛋白仅来自于菌数据库和全库,提示下一步可进行冬虫夏草指标性蛋白质功能研究,为冬虫夏草有效成分研究奠定基础。
- 童芯锌王艺璇陈璐邱乙万德光任艳彭成沈才洪李军德国锦琳
- 关键词：冬虫夏草双向电泳功能蛋白质
- 野生冬虫夏草与人工冬虫夏草蛋白质组差异研究被引量：4
- 2018年
- 目的:揭示野生冬虫夏草与人工培育冬虫夏草蛋白组的差异,为从蛋白质水平评价人工冬虫夏草奠定基础。方法:应用双向电泳技术(2-DE)对野生冬虫夏草完全体、菌虫复合体、子座及人工冬虫夏草完全体、菌虫复合体、子座的蛋白质组进行对比分析,筛选出野生冬虫夏草与人工冬虫夏草差异性蛋白质。结果:野生冬虫夏草及其菌虫复合体、子座虽然与人工冬虫夏草2-DE图谱相似,具有相似的蛋白质成分表达,但野生冬虫夏草在蛋白质含量和蛋白质种类上都高于人工冬虫夏草。结论:野生条件下环境因子可能对冬虫夏草内在蛋白质的表达具有正向的影响,且野生冬虫夏草无论在蛋白质含量还是蛋白质种类上均优于人工冬虫夏草。
- 王艺璇王芳张涵童芯锌陈璐彭成国锦琳
- 关键词：人工冬虫夏草蛋白组
- 应用转录组与蛋白组挖掘冬虫夏草形成的关键位点及野生冬虫夏草与人工冬虫夏草蛋白组差异研究
- 冬虫夏草Ophiocordyceps sinensis是麦角菌科冬虫夏草菌寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的干燥复合体。具有“补肾益肺，止咳化痰”之功效，是一种名贵中药。由于其生理生化的特殊性和复杂性，目前其子实...
- 王艺璇
- 关键词：冬虫夏草转录组蛋白组肌动蛋白
- 冬虫夏草蛋白提取物抗A549肺癌细胞及免疫活性分析被引量：21
- 2018年
- 目的：观察冬虫夏草蛋白提取物（OSPE）对肺癌细胞A549的抑制作用,研究其对免疫功能的影响。方法：以OSPE低、中、高质量浓度（100,200,500 mg·L^-1）处理A549细胞24 h;以200 mg·L^-1OSPE分别处理A549细胞12,24,48,72 h噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞活力;Hoechst 33258染色和流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链式反应（Realtime PCR）检测B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA表达。利用酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒,检测不同质量浓度OSPE对巨噬细胞分泌的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,白细胞介素-1（IL^-1）,白细胞介素-12（IL^-12）的影响。结果：OSPE具有明显抑制A549细胞活力的作用,OSPE（100,200,500 mg·L^-1）组抑制率分别为19.29%,58.70%,94.91%;200 mg·L^-1OSPE处理A549细胞（12-72 h）,抑制率呈时间依赖性;Hoechst染色后,细胞呈现典型的凋亡形态变化,流式细胞检测凋亡率显示,200 mg·L^-1OSPE呈现时间依赖性地增加A549细胞凋亡率（P〈0.01）;Real-time PCR结果显示OSPE明显上调Bax mRNA表达量,Bcl-2/Bax显著减小（P〈0.01）。ELISA检测结果显示,OSPE对正常巨噬细胞TNF-α,IL^-1,IL^-12具有显著促进分泌作用（P〈0.01）。结论：OSPE可通过上调Bax诱导凋亡,抑制A549细胞增殖;也可促进正常巨噬细胞分泌因子TNF-α,IL^-1,IL^-12的分泌,推测OSPE可通过诱导凋亡和激活免疫2种方式抑制肿瘤。
- 王玉贤王艺璇陈蓉万德光彭成沈才洪童芯锌国锦琳
- 关键词：癌细胞凋亡
- 更欣汤对围绝经期失眠模型大鼠血清雌激素水平及下丘脑雌激素受体的影响
- 2024年
- 目的:探讨国医大师肖承悰教授临床验方“更欣汤”对围绝经期失眠模型大鼠行为、血清雌激素水平及下丘脑雌激素受体表达的影响。方法:选取60只7周龄雌性SD大鼠,采用雷公藤多苷溶液灌胃联合对氯苯丙氨酸(PCPA)混悬液腹腔注射诱导围绝经期失眠大鼠模型。将26只造模成功的大鼠随机分为模型组和中药组各13只,另设空白组12只;中药组每日予更欣汤颗粒剂溶液1.8 g/kg灌胃,空白组和模型组大鼠每日予等量0.9%氯化钠溶液灌胃,周期14 d。利用旷场实验(OFT)观察大鼠行为学改变,放射免疫分析法检测大鼠血清雌二醇(E2)水平,Western Blot法检测大鼠下丘脑雌激素受体(ER)蛋白表达,RT-qPCR法检测大鼠下丘脑ERα、βmRNA表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠OFT水平与垂直活动得分均显著降低(P<0.05),修饰次数显著增多(P<0.01),血清E2显著下降(P<0.01),下丘脑ERα、ERβ蛋白表达显著下降(P<0.05),ERα/ERβ比值显著升高(P<0.01);与模型组比较,中药组大鼠修饰次数显著下降(P<0.01),下丘脑ERβ蛋白表达显著升高(P<0.05),ERα/ERβ比值下降(P<0.01)。结论:更欣汤能够上调围绝经期失眠模型大鼠下丘脑ER不同亚型蛋白表达,从而改善大鼠睡眠状态。
- 王艺璇汤玲孙天琳史梅莹陆义芹李修恒
- 关键词：围绝经期失眠下丘脑雌激素雌激素受体
- 基于DNA条形码的桑螵蛸基原动物鉴定研究被引量：7
- 2015年
- 市场调查与文献报道发现,螳螂目昆虫产的卵鞘大多作为桑螵蛸入药,而药典仅收载了3种螳螂的卵鞘,非药典品种的卵鞘入药由于未加评估可能影响临床用药安全,因此亟需研究其原昆虫,由于桑螵蛸是螳螂的卵鞘,形态学等方法无法直接判断其基原,基于DNA条形码技术在动物分类研究中广泛应用,在中药鉴定中也愈发重要。研究首次利用DNA条形码技术,获得了市售桑螵蛸的COI序列,分析了其遗传距离,并构建系统发育树,准确区分了桑螵蛸的种类和原昆虫,证实了大刀螂Tenodera sinensis和巨斧螳螂Hierodula patellifera分别为团螵蛸和黑螵蛸的基原昆虫,小刀螂Statilia maculate和薄翅螳螂Mantis religiosa均为长螵蛸的原昆虫。
- 王茜侯飞侠王艺璇王玉贤李军德袁媛彭成国锦琳
- 关键词：桑螵蛸螳螂DNA条形码
- 冬虫夏草指标蛋白IP4的cDNA全长克隆及抗原决定簇预测研究
- 2018年
- 目的克隆获取冬虫夏草指标蛋白氰酸酶(IP4)的c DNA全长及对其抗原表位预测。方法结合课题组前期采用蛋白组学法筛选得到的冬虫夏草指标性蛋白IP4和冬虫夏草转录组数据,挖掘IP4 m RNA序列,并克隆IP4 c DNA全长,通过NCBI结构分析服务系统对IP4进行保守区和功能区分析,利用DNAMAN 6.0和DNAStar软件分别进行序列比对和抗原表位分析。结果从转录组数据中挖掘到IP4的2个可变剪接体,属于内含子保留的可变剪接。RT-PCR结果显示,IP4 c DNA全长465 bp,编码154 aa(氨基酸)。IP4蛋白的保守区和主要催化活性位点位于87～154 aa,该区域为氰酸酶家族保守核心区域和二聚体结合区域,DNAMAN 6.0分析结果表明1～39 aa和55～81 aa区具有较高种属特异性,DNAStar预测IP4蛋白的抗原表位区主要分布于25～90 aa。结论最终确定IP4的25～39 aa和55～81 aa为最佳抗原特异区,为后续规模化制备IP4蛋白特异抗原区及免疫法鉴定冬虫夏草奠定基础。
- 张涵童芯锌王芳王艺璇彭成国锦琳
- 关键词：冬虫夏草CDNA克隆
- 更欣汤对围绝经期失眠模型大鼠下丘脑生物钟基因表达的影响被引量：1
- 2023年
- 目的探讨更欣汤治疗围绝经期失眠的可能作用机制。方法60只SD雌性大鼠筛选出动情周期规律的大鼠52只,随机分为空白组13只和造模组39只。造模组大鼠采用雷公藤多苷片灌胃联合对氯苯丙氨酸(PCPA)混悬液腹腔注射建立围绝经期失眠大鼠模型。将26只造模成功的大鼠随机分为模型组和更欣汤组各13只。更欣汤组每日予更欣汤颗粒剂1.8 g/(kg·d)灌胃,空白组和模型组大鼠每日予10 ml/(kg·d)生理盐水灌胃,连续14天。观察大鼠一般行为学变化,采用戊巴比妥钠协同实验检测大鼠睡眠情况(睡眠潜伏期、睡眠持续期),采用Western blot法检测大鼠下丘脑生物钟基因CLOCK、芳基烃受体核转运体样蛋白(BMAL1)、Per1、Per2蛋白表达,RT-qPCR法检测大鼠下丘脑CLOCK、BMAL1、Per1、Per2 mRNA表达。结果戊巴比妥钠协同实验结果显示,模型组和更欣汤组大鼠睡眠持续期较空白组延长(P<0.05),各组大鼠睡眠潜伏期差异均无统计学意义(P>0.05)。与空白组比较,模型组大鼠精神状态差,前期白天及夜间均活跃、呈觉醒状态,摄食水减少,毛发竖起、色淡黄、色泽干枯、易脱落,大便呈黄绿色、质软或质稀不成形;下丘脑CLOCK、BMAL1蛋白表达水平升高,Per1、Per2蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,更欣汤组大鼠精神状态明显好转,白天活动较前减少,毛色稍黄、但有光泽,大便成形,下丘脑Per2蛋白表达水平升高(P<0.01),CLOCK、BMAL1及Per1蛋白表达水平均无统计学意义(P>0.05)。各组大鼠下丘脑CLOCK、BMAL1、Per1、Per2 mRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论更欣汤可改善围绝经期失眠模型大鼠睡眠状态,其作用机制可能与上调下丘脑生物钟基因Per2蛋白表达有关。
- 王艺璇汤玲孙天琳史梅莹陆义芹李修恒
- 关键词：围绝经期失眠下丘脑生物钟基因昼夜节律
- 碱裂解法快速提取虫草属真菌DNA研究被引量：11
- 2016年
- 目的探索一种适用于虫草属基因组DNA快速提取的方法。方法在无液氮条件下使用碱裂解法提取虫草DNA,使用ITS通用引物进行PCR扩增。考察了提取液配方、煮沸时间对DNA提取的影响以及中和剂Tris-HCl用量对PCR扩增的影响。利用优化的提取方法提取了虫草属5种虫草并用ITS通用引物进行PCR扩增。结果 80μl 0.5 mol/L Na OH进行提取,加入160μl 0.1 mol/L Tris-HCl中和,离心即可在10min内提取出虫草属真菌的DNA,PCR扩增能获得清晰目的条带。结论优化的碱裂解法可用于虫草属DNA的快速提取。
- 王茜侯飞侠王艺璇叶茂彭成沈才洪国锦琳
- 关键词：虫草属DNA快速提取碱裂解法PCR
