杜丽娟
- 作品数:3 被引量:7H指数:1
- 供职机构:重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 噬菌体Guo1复苏结核休眠菌的初步研究
- 2017年
- 目的:探索分枝杆菌噬菌体Guo1对结核休眠菌的复苏作用。方法:采用缺钾Sauton培养基培养对数生长期结核菌构建结核休眠菌模型;采用药敏检测、透射电子显微镜(电镜)观察和金胺O-尼罗红双荧光染色作为模型检测方法;采用菌落计数作为复苏的检测指标。结果:缺钾结核休眠菌模型构建成功。混合培养第1天时,空白对照组、上清组、TM4组、Guo1组菌落计数分别为(2.67±0.58)×10~2、(3.00±1.00)×10~2、(2.67±0.58)×10~2、(2.33±0.58)×10~2CFU/m L;培养第15天时,各组菌落计数分别为(7.33±1.53)×10~4、(6.67±2.08)×10^(10)、(3.00±1.00)×10^(10)、(3.33±1.53)×10^(10)CFU/m L。结论:分枝杆菌噬菌体Guo1能够复苏结核休眠菌。
- 杨婷杜丽娟曹俊郭述良
- 关键词:结核病
- 一种新型抗菌剂——噬菌体裂解酶的研究进展被引量:7
- 2018年
- 随着抗生素的广泛使用,耐药菌株的不断出现给临床治疗严重感染性疾病带来严峻的挑战,新型抗菌药及制剂的研制与开发迫在眉睫。噬菌体裂解酶是由双链DNA噬菌体感染后期表达的、能裂解细菌细胞壁的一类蛋白水解酶。近年来对噬菌体裂解酶研究显示其在原核细胞中能得到成功克隆表达,且表达的裂解酶具有较强的体内外杀菌作用。大量动物实验研究表明裂解酶制剂能特异性抗宿主菌,抗菌作用迅速,对机体安全、无害,且裂解酶之间以及与传统的抗菌剂之间具有协同杀菌作用。噬菌体裂解酶的这些特性使其在临床治疗耐药感染性疾病方面具有广阔的应用前景。
- 杜丽娟杨婷张宗德郭述良
- 关键词:基因重组克隆表达抗菌剂
- 分枝杆菌噬菌体重组体TM4-RpfE的构建
- 2017年
- 目的·构建分枝杆菌噬菌体(TM4)与复苏促进因子(Rpf)的重组体(TM4-RpfE),为联合抗结核药物实现杀灭结核休眠菌、缩短结核化疗疗程奠定实验基础。方法·电转化法将pJV53质粒转入耻垢分枝杆菌,制备重组工程菌;提取TM4基因组DNA;重叠PCR扩增目的融合基因hsp60-RpfE,多步重叠PCR扩增插入长片段HHRH(homologous+hsp60-RpfE+homologous);电转化法将噬菌体DNA与插入长片段HHRH共同转入重组工程菌,挑取单噬菌斑进行PCR和测序验证;SDS-PAGE分析重组噬菌体的蛋白表达。结果·重叠PCR扩增出全长901 bp大小的目的融合基因hsp60-RpfE和1 873 bp大小的插入长片段HHRH;PCR验证重组后的噬菌斑,分别在955 bp和301 bp处出现特异性条带;SDS-PAGE分析显示重组型噬菌体在21 000处出现特异性蛋白条带。结论·分枝杆菌噬菌体重组体TM4-RpfE构建成功,初步验证目的基因RpfE得到表达。
- 杜丽娟杨婷徐莉邢爱英刘忠泉张宗德郭述良
- 关键词:分枝杆菌噬菌体潜伏结核感染