李琴山
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 供职机构：贵州医科大学附属医院更多>>
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- MIF基因沉默对肝癌细胞系增殖凋亡及ERK/RSK2信号通路的影响被引量：4
- 2017年
- 目的探讨RNA干扰介导的巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因沉默对肝癌细胞系SMMC-7721与Hep G2凋亡的影响及可能的作用机制。方法将MIF-si RNA干扰序列转染SMMC-7721与Hep G2细胞,以Con-si RNA序列转染的细胞作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)及Western blot检测MIF沉默效果,CCK-8法测定细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率。采用Western blot检测MIF沉默后凋亡相关基因BCL-2、BAX、P53的蛋白水平及细胞外信号调节激酶(ERK)、P90核糖体s6激酶2(RSK2)、糖原合成激酶3β(GSK3β)、Bad蛋白水平及其磷酸化水平。结果沉默组细胞中MIF m RNA及蛋白表达水平与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),沉默组低于对照组;两组细胞增殖能力比较,差异有统计学意义(P<0.05),MIF沉默组细胞增殖能力低于对照组;两组凋亡率比较,差异有统计学意义(P<0.05),MIF沉默组细胞凋亡率高于对照组;两组细胞BAX、P53、BCL-2蛋白水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),MIF沉默组细胞BAX、P53的蛋白表达水平高于对照组,而BCL-2蛋白水平低于对照组;沉默组与对照组细胞中ERK、RSK2及Bad蛋白水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05),而沉默组与对照组细胞中GSK3β、p-GSK3β、p-ERK、p-RSK2及p-Bad蛋白水平比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 MIF基因沉默抑制SMMC-7721与Hep G2细胞的增殖能力并促进细胞凋亡可能是通过调节ERK/RSK2信号通路实现的。
- 周鸣余蕾李琴山王碧杨国珍
- 关键词：巨噬细胞移动抑制因子基因沉默肝癌细胞系凋亡细胞外信号调节激酶
