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徐岩

作品数：1 被引量：0H指数：0
供职机构：吉林大学生命科学学院更多>>
发文基金：全国教育科学“十五”规划教育部重点课题更多>>
相关领域：生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光蛋白
  • 1篇绿色荧光
  • 1篇绿色荧光蛋白
  • 1篇基因
  • 1篇基因表达
  • 1篇EGFP

机构

  • 1篇吉林大学

作者

  • 1篇杨亦代
  • 1篇逯家辉
  • 1篇高朝辉
  • 1篇麻越佳
  • 1篇徐岩
  • 1篇王校楠
  • 1篇孟庆繁
  • 1篇滕利荣
  • 1篇王艳平

传媒

  • 1篇生物技术

年份

  • 1篇2004
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
新型瞬时报告载体pRSET-EGFP的构建及表达
2004年
目的 :利用分子生物学技术和方法将pRSET -B质粒改建为带有绿色荧光蛋白 (GFP)突变体基因 (GFP -S6 5T)的新型瞬时表达载体pRSET -EGFP ,并在E .coli.BL2 1中得到GFP基因的高效表达。方法 :PCR法从pEGFP质粒克隆GFP -S6 5TcDNA并在 5’末端引入KpnI的位点。将扩增出来的GFP -S6 5T基因和pRSET -B质粒用HindIII和KpnI双酶切后连接构成重组质粒。用化学法把重组质粒转化到E .coli.BL2 1中 ,培养发酵液OD540 =0 .4时加入IPTG诱导GFP -S6 5T基因转录和表达 ,合成绿色荧光蛋白。还对诱导条件进行了优化 ,发酵液OD540 =0 .4加入IPTG可以得到最优表达。结果 :通过Ni2 + 柱亲和层析 ,纯化得到绿色荧光蛋白 ,SDS-PAGE电泳检测 ,分子量为 2 7kDa ,与文献报道值一致。这说明Ni2 + 柱能够有效的纯化表达产物。结论 :成功构建了新型瞬时表达载体pRSET -EGFP ,并且在E .coli.BL2
逯家辉孟庆繁高朝辉王艳平王校楠徐岩麻越佳杨亦代滕利荣
关键词：绿色荧光蛋白基因表达
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