王校楠
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：全国教育科学“十五”规划教育部重点课题更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 嗜热纤维素酶的分子克隆及性质研究
- 纤维素酶在能源、食品、轻工业和纺织等众多领域有着广阔的应用前景。来源于嗜热微生物的酶具有高热稳定性、较强的pH耐受性和有机试剂耐受性,因此嗜热纤维素酶的开发具有重要的科学研究意义和潜在的应用价值。 我们从嗜热真细菌Fer...
- 王校楠
- 关键词：分子克隆
- 文献传递
- 耐热纤维素酶基因、重组工程菌、耐热纤维素酶及应用
- 本发明属于生物工程领域，具体涉及来源于闪烁杆菌属(Fervidobacterium)细菌的耐热纤维素酶基因、重组载体、纤维素酶基因工程菌、耐热纤维素酶及应用。我们获得的耐热纤维素酶(FnCel5A、FnNHCel5A)能...
- 冯雁王校楠王玉国张作明郑柏松
- 文献传递
- 新型瞬时报告载体pRSET-EGFP的构建及表达
- 2004年
- 目的 :利用分子生物学技术和方法将pRSET -B质粒改建为带有绿色荧光蛋白 (GFP)突变体基因 (GFP -S6 5T)的新型瞬时表达载体pRSET -EGFP ,并在E .coli.BL2 1中得到GFP基因的高效表达。方法 :PCR法从pEGFP质粒克隆GFP -S6 5TcDNA并在 5’末端引入KpnI的位点。将扩增出来的GFP -S6 5T基因和pRSET -B质粒用HindIII和KpnI双酶切后连接构成重组质粒。用化学法把重组质粒转化到E .coli.BL2 1中 ,培养发酵液OD540 =0 .4时加入IPTG诱导GFP -S6 5T基因转录和表达 ,合成绿色荧光蛋白。还对诱导条件进行了优化 ,发酵液OD540 =0 .4加入IPTG可以得到最优表达。结果 :通过Ni2 + 柱亲和层析 ,纯化得到绿色荧光蛋白 ,SDS-PAGE电泳检测 ,分子量为 2 7kDa ,与文献报道值一致。这说明Ni2 + 柱能够有效的纯化表达产物。结论 :成功构建了新型瞬时表达载体pRSET -EGFP ,并且在E .coli.BL2
- 逯家辉孟庆繁高朝辉王艳平王校楠徐岩麻越佳杨亦代滕利荣
- 关键词：绿色荧光蛋白基因表达
