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Taq-Man实时荧光定量PCR同时检测O1和O139群霍乱弧菌被引量：3: 2010年; 目的针对霍乱弧菌血清群各自编码O抗原的特异性基因建立能够快速、准确地同时检测O1和O139群霍乱弧菌的荧光PCR检测方法,并克服常用PCR检测方法中经常出现的假阳性现象。方法分别以rfbM和wbfR基因作为O1和O139群霍乱弧菌的模板设计引物和探针,通过优化反应条件建立了能够同时检测O1群和O139群霍乱弧菌的二联实时荧光定量PCR方法(FQ-PCR)。对该方法的特异性、灵敏度进行评估,并对10份模拟食品样品和133份临床样品进行了检测。结果特异性试验表明,该方法能选择性检测O1和O139群霍乱弧菌,能有效地避免O141群霍乱弧菌和拟态弧菌的假阳性,特异性为100%;灵敏度试验表明,O1群霍乱弧菌和O139群霍乱弧菌检出限分别为92cfu/ml和116cfu/ml;另外,试验建立的检测方法对模拟样品和临床样品检测结果与国标法的检测结果完全一致,符合率为100%。结论该实时荧光PCR检测方法能够同时检测O1和O139群霍乱弧菌,而且特异性好、灵敏度高,能有效克服假阳性,适用于基层疾病控制、口岸检疫单位日常疫情监测和临床诊断。; 覃倚莹吴晖肖性龙余以刚张经纬; 关键词：霍乱弧菌实时荧光定量PCR

toxR基因作为荧光定量PCR靶基因设计TaqMan探针快速检测副溶血弧菌被引量：28: 2008年; 以toxR基因为靶基因,通过优化反应条件建立了快速检测副溶血弧菌的TaqMan实时荧光PCR方法。特异性试验表明,该方法能选择性检测副溶血弧菌,而与金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、单增李斯特杆菌等多种常见的食源性病原菌没有交叉反应;灵敏度试验表明,该方法最少可检测到25个拷贝的toxR基因重组质粒,对纯培养物和模拟食品样品直接检测的灵敏度分别为21 cfu/mL和210 cfu/g;重复性试验表明,同一样品于试验内及试验间的变异系数分别为0.9%和1.3%;所制作的标准曲线在2.5×101～2.5×106拷贝数之间有较好的线性关系,能对副溶血弧菌进行准确的定量分析。结果表明,本研究所建立的副溶血弧菌实时荧光PCR检测方法具有特异性好、灵敏度高、重复性好的特点,能进行定量检测,而且检测时间从核酸抽提到出实验结果仅需要3 h,是快速检测副溶血弧菌的有效手段。; 覃倚莹吴晖肖性龙杨晓泉张经纬余以刚李惠芳; 关键词：副溶血性弧菌实时荧光定量PCR TAQMAN探针

用于沙门氏菌、副溶血弧菌和霍乱弧菌复合增菌的培养基及制备方法: 本发明涉及用于沙门氏菌、副溶血弧菌和霍乱弧菌复合增菌的培养基及制备方法，以重量份数计，培养基配方组分如下：缓冲蛋白胨水0.5-1.5份、蒸馏水1000份，葡萄糖1.0-5.0份、甘露醇1.0-5.0份、丙酮酸钠0.03-...; 肖性龙余以刚吴晖李苏龙覃倚莹许喜林; 文献传递

选择性富集沙门氏菌、副溶血弧菌和霍乱弧菌的共增菌培养基SVV被引量：2: 2009年; 本研究通过单因素试验和响应面分析试验建立了能够选择性富集沙门氏菌、副溶血弧菌和霍乱弧菌的共增菌培养基SVV,采用平板计数法及三重荧光PCR技术验证了SVV的增菌效果。结果表明：SVV能同时富集以不同浓度比例混合的3种目标菌,37oC振荡培养18h后,菌体浓度达到10^5-10^8CFU/mL;SVV强烈抑制大部分的非目标菌;用荧光PCR方法检测经过37oC振荡培养18h的10份人工接种样品和608份实际样品,结果表明目标菌在SVV中增殖18h后菌量达到检测限以上,SVV联合荧光PCR检测方法的检出率为4.06%,比传统检测方法（3.78%）高,无假阴性和假阳性。SVV可望应用于水产品中沙门氏菌、副溶血弧菌和霍乱弧菌检测前的增菌处理,可简化检测过程,有效克服漏检,提高检出率。; 覃倚莹吴晖肖性龙余以刚刘冬梅李晓凤唐语谦; 关键词：沙门氏菌副溶血弧菌霍乱弧菌

用于沙门氏菌、副溶血弧菌和霍乱弧菌复合增菌的培养基及制备方法: 本发明涉及用于沙门氏菌、副溶血弧菌和霍乱弧菌复合增菌的培养基及制备方法，以重量份数计，培养基配方组分如下：缓冲蛋白胨水0.5－1.5份、蒸馏水1000份，葡萄糖1.0－5.0份、甘露醇1.0－5.0份、丙酮酸钠0.03－...; 肖性龙余以刚吴晖李苏龙覃倚莹许喜林; 文献传递

沙门氏菌、副溶血弧菌和霍乱弧菌同时检测方法的研究: 本文建立了沙门氏菌、副溶血弧菌和霍乱弧菌的同时检测方法,包括共增培养基及其三重荧光PCR检测方法,使水产品中主要致病菌的检测能够通过一步增殖培养和一步检测完成,大大缩短检测时间,简化检测步骤,提高检测效率。以BPW作为...; 覃倚莹; 关键词：沙门氏菌副溶血弧菌霍乱弧菌; 文献传递

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覃倚莹