高瀛岱
- 作品数：48 被引量：85H指数：4
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划天津市科技发展战略研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体的构建和表达被引量：19
- 2003年
- 构建和表达抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并测定该微型双功能抗体的生物学活性。采用PCR和overlapPCR方法构建抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并用双脱氧终止法测定DNA序列 ;采用亲和层析法纯化该产物 ,并用Westernblot和分子排阻层析鉴定纯化产物 ;采用免疫荧光法、放射免疫分析法鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性。DNA序列测定结果表明 :抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体已构建成功 ,表达可溶性产物的产量达 2mg L以上 ,纯化产物中二聚体的比例达 90 % ,具有与Jurkat(CD3 + )和K5 62 A0 2细胞 (Pgp+ )结合的活性 ,与抗CD3ScFv及抗PgpScFv的亲合常数相当。成功地构建了抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并获得高效表达 。
- 高瀛岱熊冬生许元富彭晖邵晓枫杨纯正朱祯平
- 关键词：抗CD3双功能抗体肿瘤免疫疗法
- 造血干细胞发生、动员、扩增及内外调控机制研究的新进展被引量：1
- 2016年
- 造血干细胞(HSC)是发现最早、在临床中广泛应用并一直起着范式作用的一类重要的成体组织干细胞。HSC研究被认为是整个干细胞生物学和再生医学的主要奠基学科之一。"十二五"期间国家重大科学研究计划(973计划)在干细胞领域设立了"HSC维持、衰老与再生的调控机制"的项目。项目组在过去的5年时间里建立了小鼠及人HSC研究的重要平台,并借此开展了有效的合作研究,取得了一系列创新性成果。本文围绕项目组的主要研究内容,从领域的研究背景、重要工作进展及其研究意义等进行简要综述。希望有助于学界和公众更好地理解HSC正常生物学功能及其在疾病中的重要作用。
- 董芳郝莎高瀛岱程涛
- 关键词：造血干细胞动员扩增
- 含笑内酯对卵巢上皮性癌细胞的作用及其机制被引量：2
- 2016年
- 目的：探讨含笑内酯对卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞的作用及其可能的机制。方法（1）不同浓度（分别为0.25、0.5、1、2.5、5、10、20、50μmol/L）含笑内酯作用卵巢癌细胞系HeyA8、SKOV3细胞及卵巢癌顺铂耐药细胞系A2780/DDP细胞72 h后，四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测3种卵巢癌细胞的生长情况，选择抑制作用最为显著的卵巢癌细胞（即HeyA8细胞）用于后续实验。（2）不同浓度（分别为5、10、20μmol/L）含笑内酯作用24 h后，流式细胞仪检测HeyA8细胞的凋亡情况，实时荧光定量PCR技术检测HeyA8细胞中RelA mRNA的表达，蛋白印迹（western blot）法检测HeyA8细胞中核因子κB（NF-κB）信号通路相关蛋白RelA和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9（caspase-9）的表达。结果（1）不同浓度含笑内酯作用72 h后，HeyA8、SKOV3及A2780/DDP细胞的生长均受到明显抑制，且均呈显著的浓度依赖性（P〈0.05）；其50％抑制浓度（IC50）分别为（9.8±2.2）、（12.0±2.1）、（12.8±1.8）μmol/L。选用抑制效果最佳的HeyA8细胞进行后续实验。（2）不同浓度含笑内酯作用24 h后，随着含笑内酯浓度的增高，HeyA8细胞的细胞凋亡比例增高，细胞存活比例下降，细胞中RelA mRNA的表达水平下降，当含笑内酯浓度为20μmol/L时，上述指标分别与其对照（仅加入溶剂者）比较，差异均有统计学意义（P〈0.01）；HeyA8细胞中RelA蛋白的表达强度逐渐减弱，而活化caspase-9蛋白的表达强度逐渐增强。结论含笑内酯对卵巢癌HeyA8、SKOV3及A2780/DDP细胞均有显著的抑制作用，且对HeyA8细胞的抑制作用最明显；其作用机制可能是通过抑制NF-кB信号通路、诱导活化caspase-9蛋白的表达来促进卵巢癌HeyA8细胞的凋亡。
- 齐政李迎辉丁亚辉纪庆杨铭高瀛岱
- 关键词：卵巢肿瘤NF-ΚB
- 二硫键稳定的抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体制备及体内外活性研究
- 目的:我们实验室已经构建并表达了抗CD3/抗Pgp(P-glycoprotein)微型双功能抗体(Diabody),体内外实验均证实对耐药肿瘤的生长具有良好的抑制作用。但是,动物实验发现抗CD3/抗Pgp Diabody...
- 刘娟妮高瀛岱王金宏邵晓枫范冬梅纪庆熊冬生杨纯正周圆
- 文献传递
- 抗CD3 ScFv/抗PgP ScFv双功能抗体的高密度发酵与纯化被引量：2
- 2008年
- 在发酵罐上采用高密度发酵的方法对抗CD3ScFv/抗PgP ScFv双功能抗体工程菌进行了培养,其发酵结果是每升发酵液的湿菌菌重150g,OD550值达121;以免疫亲和层析的方法纯化抗CD3ScFv/抗PgPScFv双功能抗体,经计算抗体产量可达146.6mg/L;间接免疫荧光测定结果经流式细胞仪分析计算表明,抗CD3ScFv/抗PgP ScFv双功能抗体能与Jurkat细胞及K562/A02细胞特异性结合。
- 王金宏刘娟妮纪庆高瀛岱熊冬生杨纯正
- 关键词：抗CD3高密度发酵
- 抗PGP单克隆抗体轻重链可变区基因及其应用
- 肿瘤细胞对多种化疗药物产生交叉耐药性/(Multidrug resistance，MDR/)是造成肿瘤化疗失败的主要原因，MDR的形成机制很多，但能在临床得到验证的耐药机制很少，其中对由P-糖蛋白/(P-glycopro...
- 高瀛岱
- 关键词：多药耐药PGP单克隆抗体
- 文献传递
- CDK9/Cyclin T(P-TEFb)及其生物学功能被引量：3
- 2007年
- 细胞周期依赖性激酶（cyclin-dependentkinases，CDKs）家族目前已经发现9个成员（CDK1～CDK9），根据其功能分为两大类：控制细胞周期的CDKs和控制细胞转录的CDKs。CDK9即属于后者。CDK9是正性转录延长因子b（positive transcription elongation factorb，P-TEFb）中的催化亚基成分，通过磷酸化RNA聚合酶Ⅱ（RNA polymeraseⅡ）和一些负性转录延长因子从而使转录从起始部位得以延伸。cdk9／cyclin T的异常表达与很多疾病的发生有密切关系。Cdk9／CyclinT将给艾滋病和肿瘤等疾病的治疗提供颇有应用前景的作用靶点。
- 曹华高瀛岱
- 抗P-gp抗体PHMA02在裸鼠体内的影像分布研究
- 2006年
- 目的研究抗P-糖蛋白(P-gp)的鼠源性单克隆抗体PHMA02在移植有K562/A02细胞瘤的裸鼠体内的影像分布。方法通过杂交瘤技术制备PHMA02抗体,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western-blot技术鉴定纯度,荧光激活细胞分选术(FACS)测抗体与K562和K562/A02细胞的结合活性,改良氯胺T法125I标记抗体,尾静脉注射入裸鼠,分时间点行SPECT扫描。结果纯化所得PHMA02纯度较高,与P-gp+的K562/A02细胞特异性结合阳性率为94.47%,注入125I标记的PHMA02后,P-gp+(K562/A02)组第2日全部裸鼠瘤区出现放射性浓聚,并在随后数日浓集进一步增强。结论125I-PHMA02抗体在P-gp+(K562/A02)组和P-gp-(K562)对照组的影像学差异可以明确区分P-gp+的肿瘤组织。
- 秦岚邵梦麟王树滨苏晔吕晶丽高瀛岱刘芳郭红
- RNA腺苷脱氨酶在MLL-AF9诱导的小鼠急性髓系白血病发病中的作用被引量：2
- 2015年
- 目的 建立敲除RNA腺苷脱氨酶1（ADAR1）的小鼠MLL-AF9融合基因急性髓系白血病（AML）模型,初步探讨ADAR1对AML发病的影响.方法 采用免疫磁珠法富集介导雌激素受体-重组酶Cre（ER-Cre）的ADAR1lox/lox及其对照ADAR1lox/lox小鼠骨髓Lineage-（Lin-）细胞,用携带MSCV-MLL/AF9-IRES-GFP的逆转录病毒感染上述Lin-细胞,流式细胞术检测感染效率,移植相同数量细胞至致死剂量和半致死剂量照射受体小鼠中,建立MLL-AF9诱导的AML模型.移植48 h后诱导ADAR1敲除,体内实验分为实验组（ER-Cre;ADAR1lox/lox＋他莫昔芬）和对照组（①ER-Cre;ADAR1lox/lox＋空载体、②ADAR1lox/lox＋他莫昔芬、③ADAR1lox/lox＋空载体）,第10、15、20天分别检测小鼠外周血GFP＋细胞比例,观察各组小鼠的存活情况.体外实验分组同上,将他莫昔芬改为4-羟基他莫昔芬,观察各组AML细胞并检测其凋亡情况.结果 成功建立敲除ADAR1的MLL-AF9融合基因AML小鼠模型.与对照组比较,体内实验中实验组AML小鼠在各时间点外周血GFP＋细胞比例均降低,存活时间明显延长,差异均有统计学意义（P值均＜0.05）;体外实验中实验组细胞总数、GFP＋细胞比例均降低,Annexin Ⅴ＋7-AAD＋和Annexin Ⅴ＋细胞比例均升高,差异均有统计学意义（P值均＜0.05）.结论 敲除ADAR1可减缓AML的发病,增加AML细胞凋亡.ADAR1在MLL-AF9诱导的AML发生和维持过程中起关键作用.
- 彭路芸杨鑫张英驰胡甜园王伟丽汪晓敏许静程涛袁卫平高瀛岱
- 关键词：腺苷脱氨酶重组融合蛋白质类白血病髓样急性基因敲除技术小鼠
- 白血病干细胞相关基因miR-99a促进AML白血病细胞增殖和耐药
- 目的 白血病治疗后耐药和复发根源于具有自我更新和持续增殖能力的白血病干细胞.MicroRNA (miRNA)表达失调很大程度参与白血病的发生和进展，与白血病干细胞关系密切.本研究通过miRNA芯片，结合NOD/SCID小...
- 司晓慧郝星石慧盛梦瑶高瀛岱杨逢春周圆
- 关键词：白血病干细胞增殖耐药
