刘淑珊
- 作品数：11 被引量：32H指数：3
- 供职机构：辽宁省农业科学院更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 柞蚕核型多角体病毒载体表达系统基因工程研究进展被引量：3
- 1995年
- 柞蚕是一种野外饲养的经济昆虫，它以蛹滞育越冬，主要分布在我国东北部山区。我国柞蚕年产茧量６万ｔ左右，占世界柞蚕茧产量的９０％以上。柞蚕核型多角体病毒（ＡｐＮＰＶ）属杆状病毒科Ａ亚组，是柞蚕脓病的病原体，对柞蚕蛹十分敏感。建立柞蚕核型多角体病毒载体表达系统，以柞蚕蛹为宿主昆虫进行外源基因的大量表达生产，具有成本低、安全、易管理，可工业化生产等特点。本文概述柞蚕核型多角体病毒载体基因工程研究的进展，其中包括核型多角体蛋白基因的克隆，核苷酸序列分析，ｍＲＮＡ起始点的确定，转移载体的组建及所载外源基因在昆虫细胞和柞蚕体内的表达等。
- 张春发刘淑珊范琦李广泽
- 关键词：病毒蛋白基因蚕病
- 用柞蚕蛹生产外源基因产物的方法
- 一种用柞蚕蛹生产外源基因产物的方法，它组建了柞蚕核型多角体病毒表达载体，利用柞蚕蛹为活体宿主，将外源基因克隆到作蚕核型多角体病毒表达载体后，将野生的柞蚕核型多角体病毒DNA与重组质粒DNA一起转染柞蚕细胞或柞蚕蛹，形成载...
- 张春发刘淑珊范琦李广泽
- 文献传递
- 樗蚕蛹精巢细胞传代培养及柞蚕NPV感染试验初步研究被引量：7
- 1997年
- 刘淑珊王林美
- 关键词：樗蚕传代培养柞蚕核型多角体病毒
- 柞蚕NPV转移载体组建及外源基因在Sf9细胞、柞蚕卵巢原代细胞和蛹体中的表达被引量：12
- 1992年
- 根据对载有ApNPV核多角体蛋白基因的片段的酶谱和核苷酸序列分析结果,采用人工合成寡核苷酸引物引导的点突变方法,去掉了该基因的起始密码子(ATG突变为ATT),经系列克隆组建了pApM740转移载体,其外源基因插入位点为nt+141(BamHI)。系用多聚酶链反应(Polymerase Chain Rea-ction简称PCR)技术,分别将nt+2～+140,nt+9～+140、和nt+37～+140切掉,组建了pApM740、741、748和736转移载体,其外源基因克隆位点分别为nt+1、+8和+36(均为BamHI切点)。将IL-4、DE基因分别克隆到pApM740、741、748和736载体中,并进行了转染表达实验:(1)将载有DE基因的上述四种载体质粒DNA分别与AcNPV_(WT)DNA共转染Sf9细胞、经免疫抗体荧光检测,供试4个载体所载DE基因均得到表达;(2)将pApM741-IL_4和pApM748-IL_4重组载体质粒DNA分别与ApNPV_(WT)DNA共转染柞蚕卵巢原代细胞,待多角体出现后,用PCR法检测病毒基因,证实IL-4基因已整合到ApNPV DNA基因组中;(3)将pApM748-DE重组载体质粒DNA与ApNPV _(WT)DNA共转染柞蚕蛹获得成功。对病蛹病毒DNA进行PCR检测,证实DE基因已整合到病毒基因组中;取病蛹体液,用免疫沉淀及Western blotting方法检测DE蛋白,证实DE蛋白确已被表达。
- 张春发刘淑珊范琦王林美李文利李广泽
- 关键词：柞蚕核型多角体
- 柞蚕外部形态的扫描电镜观察被引量：1
- 1991年
- 用扫描电镜的方法观察柞蚕卵壳、幼虫、蛹、成虫的表面构造,观察到柞蚕卵的钝端中央有卵孔,一般7—10个,周边有一层花瓣状纹,其外方有多边形卵纹,其三边之顶点有气孔,构成网状结构。柞蚕幼虫头部附器有触角、单眼、口器、吐丝器。发现了上唇内面,下唇表面有多数针状突起,下腭肢端部圆锥形突起及下腭瘤状体上分节突起上表面的微细构造。柞蚕幼虫、蛹、成虫的体表有多数体表衍生物,其中有细胞及非细胞性外突、毛丛突起及刚毛。体部附肢主要有气门、胸足、腹足。不同的发育阶段及幼虫不同时期,体表突起及附肢的形态构造不尽相同。
- 刘淑珊林华森贺桂兰孙长江
- 关键词：扫描电镜
- 樗蚕蛹精巢细胞系的建立及柞蚕NPV的体外复制被引量：2
- 1999年
- 樗蚕蛹（philosamiacynthia）精巢细胞经2年多时间的离体培养，已传至100代以上，堪称无限细胞系，命名为PC－01。原代培养经4个月，开始传代。目前细胞系生长稳定，细胞形态多为圆形，少数为长椭圆形及梭形。细胞里悬浮生长，也有半贴壁现象。细胞群体倍增时间为72h，染色体数量变化较大。细胞系对柞蚕NPV非常敏感，经同工酶测试该细胞系的酯酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性较好。
- 刘淑珊王林美
- 昆虫抗菌肽基因的合成及克隆被引量：2
- 1999年
- 设计并合成了昆虫抗菌肽（ｃｅｃｒｏｐｉｎ）Ｂ 基因，合成的抗菌肽Ｂ 基因全长１３２个碱基对，克隆到ＰＵＣ１９ 载体上，经过ＤＮＡ 序列分析证实，合成的基因序列与设计的序列完全一致。
- 范琦李文利王林美刘淑珊
- 关键词：抗菌肽基因
- 用柞蚕蛹生产外源基因产物的方法
- 一种用于基因工程的用柞蚕蛹生产外源基因产物的方法，它组建了柞蚕核型多角体病毒表达载体，利用柞蚕蛹为活体宿主，将外源基因克隆到柞蚕NPV表达载体后，将野生的ApNPV DNA与重组质粒DNA一起转染柞蚕细脆或柞蚕蛹，形成载...
- 张春发刘淑珊范琦李广泽
- 文献传递
- 樗蚕组织细胞培养及对柞蚕NPV病毒的感染试验被引量：1
- 1996年
- 采用细胞原代培养的方法对樗蚕〔ＰｈｉｌｏｓａｎｉａｃｙｎｔｈｉａｗａｌｋｅｒＦｌｄｒ．（Ｓａｍｉａ）〕的血球细胞、卵巢细胞、精巢细胞进行了初代及初期传代培养，樗蚕的组织细胞对柞蚕ＮＰＶ病毒十分敏感。
- 王林美刘淑珊
- 关键词：樗蚕细胞培养核型多角体病毒
- 柞蚕不同品种消化管解剖性状与饲料效率相关性的研究被引量：3
- 1998年
- 通过选用６个饲料效率不同的品种解剖其消化管，５次重复，观察内表面特征，测量长度，解剖观察结果发现：消化管皱褶多，弹性强，中肠细长，前后肠长是高饲料效率品种的显著特征，这一特征是选择中最有参考价值的指标，同时也是其之所以饲料效率高的一个内因。
- 姜德富王连珍刘淑珊李亚杰
- 关键词：柞蚕消化管饲料效率
