孙丽丽
- 作品数：44 被引量：55H指数：4
- 供职机构：东北林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程化学工程更多>>
- RNA干扰分析神经肽F基因及其受体对美国白蛾取食、生长发育和生殖的影响
- 2022年
- 【目的】通过对美国白蛾及其受体(NPFR)基因进行克隆及功能分析,探究NPF和NPFR基因对美国白蛾取食、生长发育以及产卵的影响,旨在为开发靶向NPF和NPFR基因的害虫防治提供理论依据。【方法】克隆获得美国白蛾NPF和NPFR基因cDNA全长,采用RT-qPCR检测NPF/NPFR基因在不同发育阶段及各组织中的表达量,利用RNAi技术探讨NPF/NPFR基因对美国白蛾生长发育和生殖以及饥饿耐受性的调控作用。【结果】美国白蛾NPF和NPFR基因开放阅读框(ORF)分别为246 bp和1176 bp,编码81个和391个氨基酸。不同发育阶段的表达模式显示HcNPF和HcNPFR基因分别在4龄幼虫和雄成虫表达量最高,分别为对照的79.62倍和2.96倍;组织特异性表达分析表明HcNPF和HcNPFR基因在中肠的表达量最高,分别为头部的3.18倍和27.09倍。与注射ds Red对照组相比,注射HcNPF和HcNPFR dsRNA在幼虫期和蛹期均有效沉默,且在96 h幼虫期沉默效率分别为32.71%和88.64%,蛹期沉默效率分别为85.68%和93.01%。幼虫期注射ds NFP和ds NPFR后取食量明显降低,ds NFP注射96 h较ds Red对照组降低了12.77%;ds NPFR处理144 h较ds Red对照组降低了21.83%,且体质量累计增长率在注射192 h后分别降低了30.89%和13.54%;靶基因沉默组(ds NFP和ds NPFR)成虫交配后平均产卵量显著低于ds Red对照组,依次为ds Red对照组的29.09%和40.22%;饥饿胁迫下注射NPF和NPFR dsRNA的美国白蛾幼虫死亡率显著增加,分别在96 h和102 h全部死亡,而对照组ds Red在96 h和102 h的死亡率分别为55.00%和58.33%。【结论】获得HcNPF和HcNPFR基因全长;在不同发育阶段与组织中HcNPF和HcNPFR表达具有特异性;沉默HcNPF和HcNPFR基因导致美国白蛾取食量和体质量累计增长率降低,对饥饿胁迫的敏感性增强。综上所述,NPF和NPFR基因在美国白蛾取食、生长发育和生殖功能方面发挥重要的作用,NPF和NPFR可作为美国白蛾绿色防治的分子靶标。
- 王晓琪孙丽丽殷晶晶曹传旺
- 关键词：美国白蛾G蛋白偶联受体
- 转LdOA1基因果蝇品系GSTs基因表达及对溴氰菊酯胁迫响应被引量：1
- 2016年
- 舞毒蛾是重要林业食叶害虫,揭示其G蛋白偶联受体介导G蛋白对GSTs的调控,这对于挖掘分子靶标开发新型杀虫剂具有重要意义。本文构建转LdOA1基因果蝇载体,获得表达LdOA1基因果蝇品系,分析了转基因果蝇GSTs基因表达量及对溴氰菊酯胁迫的响应,为明确昆虫OA1基因功能提供理论依据。通过传统的酶切-连接方法构建重组载体pUAST-att B-LdOA1,采用转基因技术构建表达LdOA1基因的纯合果蝇品系;利用PCR技术验证转基因果蝇品系;并运用实时荧光定量RT-PCR技术测定转基因果蝇GSTs Delta家族基因表达量及低浓度溴氰菊酯胁迫对GSTs基因表达量的影响。PCR扩增条带显示转LdOA1基因果蝇品系均能检测到453 bp目的基因条带。与非转基因果蝇相比,转LdOA1基因果蝇品系中GSTs Delta家族基因（除GSTd4和GSTd7）均上调表达,为非转基因组1.01-3.27倍。低浓度溴氰菊酯胁迫6 h,非转基因果蝇GSTd6和GSTd10基因被显著诱导激活,而其他GSTs基因被显著抑制,抑制率为6.48%-95.84%;胁迫12-72 h,GSTs基因（除GSTd1和GSTd10外）均被显著抑制。低浓度溴氰菊酯胁迫转基因果蝇GSTs表达量变化趋势与非转基因果蝇基本一致,但转基因果蝇品系GSTs表达量显著高于非转基因果蝇品系（除12-48 h GSTd1和GSTd10）,且胁迫6 h表达量最大。这些结果表明LdOA1基因可能介导G蛋白信号通路调控下游GSTs Delta亚家族基因表达响应溴氰菊酯胁迫。
- 孙丽丽刘鹏王志英梁斌曹传旺
- 关键词：舞毒蛾GSTS
- 一种粉红粘帚菌分生孢子粉干悬浮杀菌剂及其应用
- 本发明提供一种粉红粘帚菌分生孢子粉干悬浮杀菌剂及其制备方法，配方按质量百分数如下：粉红粘帚菌分生孢子粉5～30％、润湿分散剂8～20％、紫外保护剂0.1～1％、崩解剂2～20％、粘结剂1.0～10％和载体19～83.9％...
- 王志英孙丽丽曹传旺景天忠王超董瀛谦
- 文献传递
- 4种植物源杀虫剂对落叶松毛虫幼虫室内药效试验
- 2012年
- 测定了4种植物源杀虫剂对落叶松毛虫Dendrolimus superans(Butler)幼虫室内毒力,结果表明0.4%蛇麻子素、1%苦皮藤素、0.3%印楝素乳油稀释1 000倍、1 500倍、2 000倍液对落叶松毛虫2龄幼虫72 h校正死亡率为20.53%～92.84%,其中1 000倍液校正死亡率为80.12%～92.84%;对4龄幼虫的校正死亡率为30.01%～80.22%,其中1 000倍液校正死亡率为68.16%～80.22%。2%烟碱.苦参碱乳油500,1 000,1 500倍液对2龄和4龄幼虫72 h校正死亡率分别为42.34%～93.82%和41.16%～85.49%。4种植物源杀虫剂1 000倍液对2龄和4龄落叶松毛虫的毒力均存在差异性。
- 孙丽丽曹传旺方国飞王志英
- 关键词：落叶松毛虫植物源杀虫剂药效测定
- 昆虫口腔分泌物效应子及其在害虫防治中基于RNAi技术的应用展望被引量：1
- 2021年
- 昆虫口腔分泌物(oral secretion,OS),又称返吐液,是昆虫唾液腺分泌的唾液和肠道分泌物的混合液。昆虫取食寄主植物过程中,OS随之分泌至植物中,并影响植物的防御反应。RNA干扰(RNA interference,RNAi)是研究昆虫基因功能有价值的反向遗传学工具,也是目前最有可能应用于害虫防治的新技术。本文主要综述了昆虫OS对寄主植物防御的影响、昆虫OS效应子的鉴定和OS效应子基于RNAi技术在害虫防治中可行性及应用前景。昆虫OS对寄主植物防御的影响主要表现为干扰植物的茉莉酸信号通路、筛管阻塞、Ca^(2+)通路等防御反应,进而促进昆虫摄取食物。目前,昆虫OS效应子主要鉴定手段是通过昆虫唾液腺转录组分析和OS蛋白组分析;而已鉴定的OS效应子主要来源于刺吸式口器昆虫,在咀嚼式口器昆虫中的报道甚少;功能研究发现昆虫OS效应子在寄主植物中的表达会影响昆虫存活率、繁殖力和取食能力及昆虫和植物的其他重要生理指标,并通过鉴定OS效应子与植物防御机制的相互作用关系,进而证明OS效应子在昆虫与寄主植物关系中的重要性。基于RNAi技术,通过注射、饲喂和植物介导RNAi等方法在多种昆虫中产生了OS效应子基因下调和生长发育受影响的现象,由此说明OS效应子基因已具备作为RNAi靶标的条件。虽然目前研究尚处于实验室阶段,但已证明其应用于害虫防治方面具有一定的可行性。昆虫口腔分泌物是研究昆虫与寄主植物相互作用机制的新方向。最后,对OS未来潜在的研究方向进行了展望,以期对我国害虫防治的研究提供理论指导。
- 高源孙丽丽曹传旺
- 关键词：昆虫口腔分泌物寄主植物RNA干扰害虫防治
- 转舞毒蛾LdCYP6AN15v1基因果蝇品系对氯虫苯甲酰胺胁迫响应被引量：1
- 2017年
- 【目的】舞毒蛾是林业重要害虫,细胞色素P450是昆虫体内广泛分布的参与外源化合物代谢关键酶系,探讨P450家族基因CYP6AN15v1对杀虫剂代谢解毒功能,为舞毒蛾有效治理提供依据。【方法】通过RT-PCR法获得Ld CYP6AN15v1基因c DNA全长,采用传统酶切连接的方法构建转CYP6AN15v1基因果蝇载体,通过转基因技术获得表达Ld CYP6AN15v1果蝇品系(命名为att P40>CYP6AN15v1)。采用分光光度计法研究低剂量氯虫苯甲酰胺(7.17mg·L^(-1))处理对转基因和非转基因果蝇品系细胞色素P450活性的影响,并采用qRT-PCR法测定其对CYP6AN15v1基因表达的影响。【结果】从舞毒蛾无参照转录本文库中克隆获得CYP6AN15v1全长基因,编码512个氨基酸,蛋白分子质量为59.02 k Da;系统进化树分析表明CYP6AN15v1与甜菜夜蛾和棉铃虫关系较近。以DNA和c DNA为模板,att P40>CYP6AN15v1果蝇品系均检测到1 539 bp目的基因,表明Ld CYP6AN15v1基因成功整合到果蝇基因组。与非转基因att P40果蝇品系相比,转基因att P40>CYP6AN15v1果蝇品系对氯虫苯甲酰胺的敏感性显著降低,致死中浓度LC50为非转基因果蝇的2.92倍;低剂量(7.17 mg·L^(-1))氯虫苯甲酰胺胁迫下,舞毒蛾细胞色素P450酶活性和CYP6AN15v1基因的诱导作用呈现时间效应,att P40>CYP6AN15v1果蝇品系P450活性为非转基因果蝇的1.09~1.93倍,主要表现为诱导效应;att P40>CYP6AN15v1果蝇品系的CYP6AN15v1基因mRNA表达量呈诱导激活,其表达量为非转基因的44.54~137.80倍。【结论】利用转基因技术成功构建了转Ld CYP6AN15v1果蝇品系att P40>CYP6AN15v1;氯虫苯甲酰胺可能通过诱导Ld CYP6AN15v1基因mRNA的上调表达而增强黑腹果蝇P450酶活性,从而参与对氯虫苯甲酰胺的解毒作用。
- 党英侨殷晶晶陈传佳孙丽丽刘鹏曹传旺
- 关键词：舞毒蛾氯虫苯甲酰胺
- 舞毒蛾G蛋白偶联受体功能鉴定及对杀虫剂胁迫响应机制
- 舞毒蛾(Lymantria dispar Linnaeus)是世界性的害虫之一，分布广，食性杂，主要危害叶片造成巨大的经济损失。目前，舞毒蛾防治主要依赖于化学杀虫剂，高频率的使用化学杀虫剂易使舞毒蛾产生抗药性。因此，寻找...
- 孙丽丽
- 关键词：舞毒蛾G蛋白杀虫剂胁迫响应
- 美国白蛾速激肽受体基因及dsRNA和防治美国白蛾中应用
- 本发明公开一种美国白蛾速激肽受体基因及dsRNA和防治美国白蛾中应用。所述的速激肽受体基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，编码如SEQ ID No.2所示氨基酸序列的蛋白质。所述的速激肽受体基因dsRNA，其...
- 孙丽丽曹传旺王志英张晨书彭萌萌闫丽琼
- 苏云金杆菌和白僵菌可湿性粉剂研制及杀虫毒力测定被引量：12
- 2014年
- 以苏云金杆菌和白僵菌为有效成分制成混配菌剂,采用高效小型粉碎机将筛选的助剂及原药混匀,在测定助剂对微生物活体的生物活性、制剂性能影响的基础上,进行混配菌剂助剂的筛选。通过生物测定筛选获得最佳混配比例,并将其加工成可湿性粉剂。结果表明:苏云金杆菌库斯塔克亚种和球孢白僵菌最佳混配质量比为3∶1,润湿分散剂为1%Morwet EFW、3%SDS、9%Morwet D425、9%TERSPERSE 2020;紫外保护剂为0.3%黄原胶,以凹凸棒土为载体补足100%。以此配方制备的混配菌剂的质量悬浮率72.73%,孢子悬浮率75.13%,润湿时间<1min,平均粒度为13.76μm。苏云金杆菌和白僵菌可湿性粉剂中各指标符合商品制剂的标准,对黄褐天幕毛虫毒力分别高于苏云金杆菌和白僵菌可湿性粉剂单剂,是一种具有高杀虫活性、持效期长、环境友好型绿色农药。
- 王志英孙丽丽张健曹传旺
- 关键词：苏云金杆菌白僵菌可湿性粉剂
- 棘孢木霉可湿性粉剂研制及杀菌活性测定被引量：8
- 2015年
- 以棘孢木霉分生孢子粉、发酵液冻干粉为有效成分制备混配杀菌剂。在测定助剂对棘孢木霉生物活性的基础上，利用正交试验设计法测定助剂对制剂性能的影响，进一步确定助剂种类和含量；通过机械粉碎法将棘孢木霉分生孢子粉、发酵液冻干粉与助剂混合配比加工成可湿性粉剂。室内离体试验法测定棘孢木霉分生孢子粉和发酵液冻干粉不同配比的制剂对油菜菌核病菌抑菌活性，获得最佳比例，并将其加工成可湿性粉剂。结果表明：棘孢木霉孢子粉和发酵液冻干粉可湿性粉剂最佳配比（质量比）为1：1，润湿分散剂为1％Morwet EFW、5％TERWET 1010、5％Morwet D425、7％木质素磺酸钙；紫外保护剂为0．3％纳米氧化锌，以硅藻土为载体补足100％。该配方可湿性粉剂的孢子萌发率为88．57％，质量悬浮率达81．79％，孢子悬浮率80．12％，润湿时间〈10s，平均粒径27μm，符合商品制剂的标准。室内生物测定结果表明，不同混配比例制剂均有一定的增效作用，但该配比可湿性粉剂增效作用最为显著，其中1600倍液对油菜菌核病菌防治效果比孢子粉、发酵液冻干粉单剂分别高21．67％和12．09％，抑制率范围为64．17％-88．67％。该制剂属于环境友好型绿色农药，为农林植物病害的生物防治提供了一种新生防材料。
- 孙丽丽曹传旺薛绪亭王志英杜春艳
- 关键词：毒力测定可湿性粉剂
