李保强
- 作品数：12 被引量：28H指数：3
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- 肺炎支原体重组蛋白抗原的初步鉴定
- 2005年
- 克隆并表达肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)P1黏附蛋白D-2区基因片段,进而对重组蛋白的抗原特异性进行鉴定.应用PCR技术获取目的基因片段,并构建含有目的基因片段的重组质粒,用重组质粒酶切图谱法、PCR扩增及核苷酸测序方法鉴定重组质粒.而后将其转入大肠杆菌BL21菌株,用IPTG诱导目的基因表达,用SDS-PAGE分析重组蛋白的相对分子量,免疫印迹实验鉴定其免疫反应性,并用ELISA实验测定重组蛋白抗原的特异性.结果重组质粒中的p1基因片段经测序后,与GenBank中p1基因核苷酸序列比较,其同源性为99.66%～100%;经SDS-PAGE分析,重组蛋白的相对分子量约为 59 ku;免疫印迹实验和ELISA实验证实,Mp免疫血清和Mp感染患者血清都能与重组蛋白发生特异反应.研究中的含P1黏附因子D-2区基因的重组质粒已成功构建,其表达的重组蛋白具有特异的免疫反应性,初步ELISA实验证实,本研究获得的重组蛋白可用于临床标本检测.
- 李保强赵芝娜宋焕景董占双刘忠顺王桂珍
- 关键词：肺炎支原体重组蛋白
- 895株铜绿假单胞菌院内感染分布及耐药性变迁分析被引量：6
- 2012年
- 目的了解我院铜绿假单胞菌感染分布特点及对抗生素耐药性的变化趋势,为临床合理用药提供依据。方法对2008年1月至2010年12月住院患者送检各类标本进行分离培养,采用VITEK-32全自动微生物仪进行菌株鉴定,用K-B纸片扩散法检测对17种抗菌药物的敏感性。结果 895株铜绿假单胞菌检出以痰液最多占81.5%,主要分布在综合科、呼吸内科、神经内科。铜绿假单胞菌对17种抗菌药物的耐药率呈逐年上升趋势。阿米卡星、美洛培南和亚胺培南对铜绿假单胞菌具有较好的抗菌活性,可作为治疗重症铜绿假单胞菌感染的首选。结论铜绿假单胞菌的感染和耐药情况日趋严峻,加强耐药性监测,根据药敏结果合理使用抗菌药物是控制细菌感染与耐药的关键因素,以减少耐药菌株的产生与传播。
- 李保强翟如波张昊邱广斌
- 关键词：耐药
- 肺炎支原体P1蛋白结构基因的克隆与鉴定
- 2001年
- 目的 :在大肠杆菌中克隆肺炎支原体P1蛋白结构基因 ,为实现肺炎支原体P1蛋白结构基因的大量扩增及表达奠定基础。方法 :PCR方法获取肺炎支原体P1蛋白结构基因 ,并与 pUC19载体DNA连接 ,转入大肠杆菌JM10 9菌株。X -Gal平板筛选转化子 ,用PCR方法和限制性核酸内切酶酶切图谱分析方法鉴定重组克隆。结果 :PCR和限制性核酸内切酶图谱分析均证实所获重组质粒中含有P1蛋白基因。结论 :获得了含有肺炎支原体P1蛋白结构基因的克隆菌株。
- 王桂珍李保强董占双刘忠顺刘洪瑞韩雪松
- 关键词：P1蛋白肺炎支原体基因克隆
- 细菌性阴道病三种实验室诊断方法探讨
- 目的分析细菌性阴道病（BV）检测结果及临床意义;方法采用革兰染色查线索细胞,阴道分泌物涂片记分系统和BV的实验室快速诊断三种方法对508例病人和42例健康体检妇女阴道分泌物进行BV检测;结果BV阳性检出率为21.25%-...
- 李保强翟如波
- 文献传递
- 沈阳地区肺炎支原体分离株P1蛋白基因限制性酶切图谱分型研究
- 2001年
- 目的 :根据肺炎支原体 (MP)P1蛋白基因限制性酶切图谱分类MP临床分离株 ,调查沈阳地区肺炎支原体流行情况。方法 :多聚酶链反应扩增MPFH标准株和MP临床分离株的P1基因片段 ,扩增产物用限制性内切酶HeaIII消化 ,1.5 %琼脂糖凝胶电泳分析。结果 :肺炎支原体临床分离株和FH标准株酶切图谱相同。结论 :沈阳地区肺炎支原体分离株属于Ⅱ型。
- 王桂珍董占双刘中顺李保强
- 关键词：肺炎支原体P1基因
- 肺炎支原体P1蛋白结构基因片段的制备及C末端基因片段克隆的研究
- 2001年
- 目的 制备肺炎支原体P1蛋白结构基因 ,并在大肠杆菌中克隆肺炎支原体P1蛋白C末端基因片段 ,为P1蛋白基因片段的扩增、表达及探讨C末端基因片段功能打基础。方法 PCR扩增方法获取P1结构基因。扩增产物用P1蛋白基因特异引物扩增鉴定。用SalⅠ和EcoRⅠ双酶酶切消化方法制备P1蛋白C末端基因片段 ,并与pUC19DNA连接 ,转入大肠杆菌JM10 9菌株。用X - gal平板及质粒图谱分析方法筛选重组克隆株 ,再用限制性核酸内切酶酶切图谱分析鉴定。 结果 经PCR扩增MPDNA获得一条 5 .0kbDNA片段 ,用P1基因区特异引物扩增鉴定获得阳性结果。重组质粒限制性内切酶指纹图谱显示出两条带 ,一条为 pUC19载体DNA带 ,另一条是 1kb的插入片段。
- 王桂珍董占双刘忠顺李保强
- 关键词：肺炎支原体基因克隆
- 儿童呼吸道感染肺炎链球菌耐药性监测分析被引量：7
- 2014年
- 肺炎链球菌是引起儿童院外获得性肺炎的主要病原菌之一，也是引起中耳炎、鼻窦炎、化脓性脑膜炎以及菌血症等常见感染的主要病原菌。近年来，肺炎链球菌对青霉素等多种抗菌药物耐药性在国内外普遍呈上升趋势[1]。因此，对肺炎链球菌耐药性及其传播情况的研究是一项重要而紧迫的任务。为了解本院肺炎链球菌的耐药情况，本研究对本院儿童呼吸道感染标本中分离的肺炎链球菌进行常用抗菌药物的耐药性分析，结果报道如下。
- 李保强孙跃岭翟如波邱广斌
- 关键词：呼吸道感染监测分析儿童抗菌药物耐药性肺炎链球菌化脓性脑膜炎
- 肺癌患者胸腔脓汁中分离出黄褐二氧化碳噬纤维菌1例被引量：1
- 2012年
- 从我院1例肺癌患者胸腔脓汁中分离出黄褐二氧化碳噬纤维菌（Capnocytophaga ochracea）1株，报道如下。
- 孙跃岭李保强
- 关键词：肺癌脓汁
- 肺炎支原体P1蛋白羧基端基因片段在大肠杆菌中克隆的研究被引量：1
- 2001年
- 在大肠杆菌中克隆肺炎支原体P1蛋白羧基端基因片段 ,为P1蛋白基因片段的扩增、表达及探讨羧基端基因片段功能打基础。采用PCR扩增方法获取P1结构基因。扩增产物用SalI和EcoRI酶切消化 ,回收 1kb大小的DNA片段并与 pUC19DNA连接 ,转入大肠杆菌JM10 9菌株。用X gal平板及质粒图谱分析方法筛选重组克隆株 ,再用限制性核酸内切酶酶切图谱分析鉴定。经PCR扩增MPDNA获得 1条 5 .0kbDNA片段。重组质粒限制性内切酶指纹图谱显示出 2条带 ,1条为pUC19载体DNA带 ,另 1条是 1kb的插入片段。实验获得肺炎支原体P1蛋白结构基因及含P1蛋白羧基端DNA片段的重组克隆株。
- 王桂珍李保强董占双刘忠顺
- 关键词：肺炎支原体基因克隆
- 308株鲍曼不动杆菌感染分布及耐药性分析被引量：12
- 2012年
- 目的了解鲍曼不动杆菌的临床分布及其耐药性,为临床合理使用抗生素提供依据。方法对临床分离的308株鲍曼不动杆菌进行回顾性分析,计算对常用的16种抗生素耐药率。结果 308株鲍曼不动杆菌中,2008年72株(占22.38%),2009年109株(占35.39%),2010年127株(占41.23%)。科室分布:以呼吸科(70株)、老年干诊科(69株)、烧伤科(43株)为主。标本分布:以痰标本为主(210株),其次创面分泌物(39株);药敏试验除对头孢哌酮/舒巴坦和米诺环素耐药率较低外,对其余14种抗生素耐药率较高,表现为多药耐药,并呈逐年上升趋势。结论鲍曼不动杆菌多药耐药现象严重,应加强耐药性监测,了解耐药变迁情况,以指导临床合理用药。
- 李保强孙跃岭翟如波邱广斌
- 关键词：鲍曼不动杆菌耐药分析合理用药
