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武宁: 作品数：10 被引量：32H指数：4; 供职机构：西北农林科技大学更多>>; 发文基金：陕西省科技统筹创新工程计划项目国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>; 相关领域：农业科学更多>>

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LMH细胞感染禽腺病毒血清4型早期miRNAs和mRNAs表达变化研究: 禽心包积液肝炎综合征(hepatitis-hydropericardiμm syndrome,HHS)是一种以急性感染为主的家禽传染病。该病由高致病性禽腺病毒血清4型(Fowl Adenovirus,FAd V-4)引起...; 武宁; 关键词：转录组测序; 文献传递

检测猪分子伴侣Jiv基因的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法的建立被引量：1: 2013年; Jiv蛋白是一种与猪瘟病毒（CSFV）复制密切相关的细胞分子伴侣，为检测CSFV感染细胞内分子伴侣Jiv基因表达变化，本研究以猪Jiv基因（DNAJCl4）为参考序列，建立了检测猪分子伴侣JiV基因的SYBRGreenI荧光定量RT．PCR方法。结果显示，所建方法的标准曲线相关系数为0．999，扩增效率为103．4％，在10‘～10’拷贝数范围内具有较好的线性关系；对Jiv基N最低可检测到10拷贝，该方法的批内变异系数和批间变异系数均在O．5％以下，具有较高的敏感性和重复性。应用建立的方法对猪多种组织及猪源传代细胞中Jiv基N的表达进行检测，结果显示Jiv基因在所检测的组织和细胞中均有表达，表明所建方法可以用于Jiv基因的检测；同时对CSFV感染猪和阴性猪脾脏中的Jiv基因表达水平进行检测，统计发现CSFV感染猪脾脏中的Jiv基因表达水平显著上调，提示Jiv基因的表达在CSFV复制中发挥着一定的作用。本研究建立的检测猪Jiv基因的荧光定量RT．PCR方法为进一步明确Jiv蛋白在CSFV致病中的作用提供方法支持。; 谭学超郭抗抗宁蓬勃刘伟曹伟伟徐磊武宁林青; 关键词：猪瘟病毒荧光定量RT-PCR SYBR

屠宰生猪胸膜炎的病原检测: 2014年; 在屠宰场内,经常可以看到屠宰生猪存在不同程度的胸膜炎病变。这些胸膜上的炎症往往由胸膜肺炎病变持续感染发展而来。试验从宏观角度上统计屠宰生猪出现胸膜炎病变的发生情况,并对胸膜肺炎病变肺脏进行病原菌的分离鉴定。采用屠宰场胸膜炎评估系统(SPES),选取某集约化生猪养殖场的9个畜群,每个畜群随机抽取200份肺脏样品,进行胸膜炎的评价,并随后检测胸膜肺炎的病原菌。其中不同程度的胸膜炎病例占调查肺脏总数的52.1%。打分SPES>1的病变肺脏比例为24.0%。从胸膜肺炎病变肺脏中分离出胸膜肺炎放线杆菌26株,副猪嗜血杆菌9株,多杀性巴氏杆菌11株和猪链球菌15株。; 邱渊皓魏江华任娟娟唐攀刘万华武宁李涛伍成奇王晶钰; 关键词：屠宰生猪胸膜炎胸膜肺炎病原菌检测

布鲁菌S2疫苗株免疫牛与牛种、羊种布鲁菌自然感染牛ELISA鉴别诊断方法的建立被引量：6: 2014年; 为建立区分猪种布鲁菌S2疫苗株接种奶牛与布鲁菌自然感染奶牛,BLAST比对分析羊种、牛种、猪种、犬种、沙林鼠种和绵羊种6种布鲁菌基因序列,发现repA-related基因是猪种布鲁菌与牛种及羊种布鲁菌的差异基因。设计引物PCR扩增获得repA-related基因片段,克隆并原核表达得到了布鲁菌repA-related融合蛋白,以repA-related蛋白建立间接ELISA检测方法。用repA-related蛋白间接ELISA检测猪种S2疫苗株接种动物血清为阳性,检测牛种和羊种布鲁菌自然感染动物血清为阴性。repA-related蛋白间接ELISA能从试管凝聚实验(SAT)及常规ELISA检测阳性的奶牛血清样本中,区分出S2疫苗接种牛与牛种布鲁菌感染牛。; 武宁王晶钰刘万华邱渊皓任娟娟唐攀曹晓蕾陈占莉江越德; 关键词：布鲁菌病

布鲁菌S2疫苗免疫牛与牛种布鲁菌自然感染牛ELISA鉴别诊断方法的建立: 布鲁菌病是由布鲁菌引起的人兽共患传染病。在动物布鲁菌病的检疫中使用较为广泛的的方法有虎红平板凝集实验（RBST）、全乳环状试验（MRT）、试管凝集实验（SAT）和间接ELISA等血清学检测方法，但这些方法无法区分布鲁菌疫...; 武宁; 关键词：布鲁菌病间接ELISA; 文献传递

鸡源沙门菌PFGE分型及耐药性研究被引量：13: 2013年; 为了解某规模化养鸡场沙门菌的流行情况及耐药现状,对分离于该场的病、死鸡42株沙门菌进行血清型鉴定,K-B药敏纸片法检测分离菌的药物敏感性,采用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)对分离菌进行PFGE分型研究。结果显示,42株鸡源沙门菌可分为4种血清型,其中以肠炎沙门菌为优势血清型;分离菌对四环素、氨苄青霉素和萘啶酸普遍耐药,耐药率均在60%以上,4重以上耐药菌株占88.9%;42株鸡源沙门菌可分为7个PFGE型,各型间相似性较高,部分型菌株间相似性高达90%以上。结果表明,该养殖场鸡源沙门菌的耐药性普遍存在,且以多重耐药为主,PFGE分型结果表明,该场流行的沙门菌可能是由少数菌株传播引起的。; 唐攀崔恩慧刘万华任娟娟武宁邱渊皓王晶钰; 关键词：沙门菌血清型耐药性脉冲场凝胶电泳

陕西省avian-like H1N1猪流感病毒的遗传进化分析被引量：1: 2013年; 【目的】监测陕西省猪流感的流行与传播情况,为猪流感研究提供参考。【方法】从生猪养殖场和屠宰场表观健康猪中随机采取猪鼻/气管拭子样本,经SPF鸡胚分离,对HA阳性样本进行猪流感病毒RT-PCR鉴定。测定分离株全基因序列,通过MEGA4构建基因进化树,并进行遗传变异分析。【结果】从500份样本中分离鉴定出6株H1N1流感病毒,病毒分离率为1.2%。获得6个核苷酸相似性为98.3%—99.1%的分离株全基因序列。遗传进化分析表明6个分离株都位于avain-like H1N1猪流感病毒谱系,与中国江苏,辽宁,山东和香港等地H1N1猪流感病毒株同源性达97%—99%。6个分离株的8个基因片段均在蛋白受体结合位点、潜在糖基化位点等处发生核苷酸变异,这将会影响猪流感病毒的抗原特性、宿主适应性和致病力。【结论】首次从西北地区表观健康猪中分离到H1N1猪流感病毒,并获得6个分离株的全基因序列。遗传进化分析表明,6个分离株为avain-like H1N1猪流感病毒,且多处氨基酸位点发生变异。; 任娟娟王晶钰刘红彦刘万华武宁邱渊皓唐攀江跃德; 关键词：遗传进化

规模化养鸡场大肠杆菌病综合防治措施: 目的：以我国3省份规模化养鸡场分离鉴定的1002株鸡源大肠杆菌为研究对象,了解我国鸡源E.coli的耐药性和耐药基因的年度变化及耐药基因与耐药性之间的相关性,制定科学的防治方案.方法：采用K-B药敏纸片法检测E.coli...; 王晶钰唐攀王利勤刘万华任娟娟武宁邱渊皓; 关键词：规模化养鸡场大肠杆菌病耐药基因; 文献传递

鸡新城疫病毒的分离鉴定与交叉免疫保护试验被引量：6: 2013年; 为了评价疫苗免疫保护效果,进而筛选出最佳的免疫方案,将分离到的鸡新城疫病毒(Newcas-tle disease virus,NDV)流行毒株制备成灭活疫苗进行交叉免疫保护试验研究。把采集到的疑似发生新城疫的病鸡肺、气管环等组织经处理后接种10日龄SPF鸡胚进行病毒的分离和增殖,并用血清学和分子生物学方法进行毒株的鉴定;用分离到的NDV/Chicken/TC/1/2011毒株制成油乳剂灭活苗,与La Sota疫苗以不同的疫苗组合免疫SPF鸡,进行交叉免疫保护试验。结果显示,共分离到9株新城疫病毒,其F蛋白裂解位点的氨基酸均为112 R-R-Q-K-R-F117,表现为强毒株的分子特征,与致病指数结果一致。分离株灭活苗组和分离株灭活苗+La Sota弱毒苗对试验鸡的免疫保护力最高,其次是La Sota灭活苗+La Sota弱毒苗和LaSota灭活苗,La Sota弱毒苗对试验鸡的免疫保护力最低。NDV分离株与疫苗株La Sota存在明显抗原性差异,这将对新城疫疫苗的发展和疾病控制策略制定至关重要。; 刘万华王晶钰武宁唐攀任娟娟邱渊皓江跃德陈占莉曹晓蕾; 关键词：新城疫病毒疫苗

肉鸡源致病性大肠埃希菌中β-内酰胺类抗生素耐药基因的检测被引量：4: 2013年; 为了解大型肉鸡养殖场致病性大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)对β-内酰胺类抗生素中的头孢菌素类抗生素的耐药性变化,以及β-内酰胺酶耐药基因的携带情况及耐药基因与耐药性的相关性,从陕西省的部分规模化养鸡场的病、死鸡中分离鉴定并保存108株致病性E.coli。采用K-B药敏纸片法检测致病性E.coli分离株对7种β-内酰胺类药物的药敏性,PCR方法检测3种β-内酰胺酶耐药基因,用DNA Star软件对获得的耐药基因序列与GenBank中的相关序列进行比对。结果显示,鸡源致病性E.coli分离株对头孢派酮、头孢他啶、头孢噻肟、头孢唑啉、头孢曲松、头孢呋肟、头孢噻吩的耐药率分别为83.3%、18.5%、72.2%、92.6%、88.9%、90.1%和95.7%。三重以上耐药菌株占88.9%。β-内酰胺酶基因tem和ctx-m的检出率分别为98.1%和74.1%,未检测到shv基因。结果表明,快大型肉鸡致病性E.coli对β-内酰胺类抗生素的耐药性普遍存在,以多重耐药为主。耐药基因tem和ctx-m的检出率与其耐药性呈正相关。; 金彪伍成奇唐攀邱渊皓刘万华武宁王晶钰; 关键词：大肠埃希菌 Β-内酰胺酶基因肉鸡

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