许国超
- 作品数：37 被引量：48H指数：4
- 供职机构：江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程理学更多>>
- 糖基转移酶UGT73C5在大肠杆菌中的可溶性表达研究被引量：1
- 2023年
- 络塞是一种抗高原反应药物的主要活性成分,可通过尿苷二磷酸糖基转移酶UGT73C5催化肉桂醇糖基化反应合成。然而UGT73C5在大肠杆菌宿主中可溶性表达极差,严重限制了其工业应用。该研究分别通过与分子伴侣共表达和与助溶蛋白标签融合表达的方式,提高UGT73C5在Escherichia coli BL21(DE3)中的可溶性表达。结果显示,除质粒pKJE7外,与分子伴侣质粒pG-KJE8、pGro7和pG-TF2共表达后均可提高UGT73C5酶活力,分别为原始酶活力(18.56 U/g细胞)的1.27、1.18、1.37倍。此外,利用硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)和谷胱甘肽巯基转移蛋白(glutathione S-transferase,GST)两种助溶蛋白标签,构建的融合酶Trx-UGT73C5和GST-UGT73C5的酶活力为原始酶活力的1.45、2.54倍,且纯化后的比酶活力为原始酶的80%~90%。最后,在2 mmol/L肉桂醇合成络塞的反应中,相同浓度细胞破碎液(粗酶)融合酶GST-UGT73C5比原始酶催化效率更高,4 h后转化率可以达到90%以上,最终转化率达到93.6%。因此,助溶蛋白标签融合表达法可有效提高UGT73C5在大肠杆菌中的可溶性表达,且融合酶GST-UGT73C5在络塞的酶法合成中具有更大的应用潜力。
- 方红辉倪晔周婕妤董晋军许国超张兆俊韩瑞枝
- 关键词：糖基转移酶可溶性表达分子伴侣肉桂醇
- 浅谈《生物催化工艺学》教学内容和教学方法的改进
- 2016年
- 《生物催化工艺学》是生物工程和生物技术专业的重要课程之一。针对生物催化工艺学课程的特点,应当将生物催化研究及行业发展的最新方法和成果及时充实到教学内容中,并对教学方法和考核方式进行改革,提升教学效果和学生的综合能力。以学生为中心,教学相长,激发学生的学习热情,采用灵活的授课和考核方式,增加学生的学习主动性,为国民经济的发展提供更多的生物化工专业技术人才。
- 许国超倪晔
- 关键词：教学内容教学方法
- 硫酸盐还原菌的分离纯化及生长特性研究被引量：8
- 2011年
- 硫酸盐还原菌(SRB)是一类形态各异、营养类型多样,在缺氧或厌氧的条件下,能利用硫酸盐或者其他氧化态硫化物作为电子受体来氧化有机物的细菌或古菌,可以是革兰氏阴性或阳性。SRB所引起的微生物腐蚀受到了人们的广泛关注。本次实验是以西南石油大学附近的加油站淤泥为主要原料,采用叠皿夹层法对富集后的淤泥进行分离纯化,然后在不同的生长条件下(pH值,矿化度)对其生长特性分别进行研究。经实验研究得到如下结论:在pH值小于5.0和大于9.5时,硫酸盐还原菌是不能存活的,而在pH值为7.5时为硫酸盐还原菌最适生长pH值。SRB可以生长繁殖的矿化度范围是7.5～30 g/L,16 g/L时为其生长繁殖最适矿化度。
- 陈一鸣吴雁马远荣许国超曲韵滔史素青
- 关键词：硫酸盐还原菌分离纯化PH值温度矿化度
- 低共熔溶剂和次氯酸钠组合预处理秸秆及在丁醇发酵中的应用被引量：4
- 2020年
- 随着传统化石能源日趋枯竭,木质纤维素生物质等可再生资源的综合利用得到越来越多的关注。为了更好地利用木质纤维素生物质,采用物理、化学或生物方法降低其结构顽抗性是必不可少的步骤。在前期研究中,本文作者所在实验室发现了一种乙胺盐酸盐为氢键受体、乳酸为氢键供体的新型低共熔溶剂(EaCl∶LAC),其对玉米芯有很好的去除半纤维素的作用。本文将EaCl∶LAC用于预处理水稻秸秆,并结合碱性氧化剂NaClO,进一步提高了木质素的去除率。在最优条件下,经EaCl∶LAC/NaClO预处理后水稻秸秆的半纤维素和木质素的去除率分别为94.9%和80.2%。将预处理后水稻稻秆经纤维素酶解可得到总还原糖浓度为60.46g/L的秸秆水解液。采用梭菌Clostridium saccharobutylicum DSM13864利用稻秆水解液进行丁醇发酵,72h后丁醇浓度为10.16g/L,丁醇的糖醇产率为0.22g/g(total sugar)。本文提供了一种提高木质纤维素生物质酶解效率和水解液还原糖浓度的方法,无需外源添加葡萄糖和脱毒处理,可直接用于发酵合成生物丁醇。
- 李浩邢婉茹许国超倪晔
- 双芳基醇脱氢酶的立体选择性识别机制探究
- 光学纯的双芳基醇是一类重要的手性砌块化合物，可广泛地用于药物、农业化学品和天然产物的合成，如：抗组胺药、止痛药和镇咳药。光学纯(4-氯苯基)-(吡啶-2-基)甲醇(CPMA)是合成抗组胺倍他司汀类药物的重要手性中间体，可...
- 周婕妤许国超倪晔
- 关键词：醇脱氢酶生物催化
- 复杂错流多效蒸发系统设计的模型与解法
- 2013年
- 为了实现能量的有效利用以及满足不同性质原料液的蒸发,对蒸发过程采用额外蒸汽引出、冷凝水闪蒸的节能措施,建立了多效错流蒸发的系统模型。用迭代法结合矩阵法对模型求解。研究表明,多效错流蒸发系统模型有通用性。对溶液蒸发采用冷凝水闪蒸、多效蒸汽引出预热原料液的模型进行设计表明,求解模型稳定且效率较高。
- 许国超王金玉马远荣刘阳
- 关键词：多效蒸发二次蒸汽数学模型
- 酪氨酸脱羧酶的可溶性表达优化及酶法合成酪胺的研究
- 酪胺是一种自然存在的痕量单胺，具有多种生理生化功能，在医药、保健和化妆品方面具有广泛应用。目前酪胺的制备方法包括化学合成法、生物发酵法和生物催化法。化学合成过程中存在环境污染严重、产物提取工艺复杂的问题;生物发酵法培养基...
- 姜明扬许国超倪婕倪晔
- 关键词：酪胺可溶性表达
- 醇脱氢酶KpADH的127位点对催化活性和对映选择性的影响
- 2019年
- 醇脱氢酶可用于合成手性化合物,在医药、材料等领域应用广泛。来源于多孢克鲁维酵母(Kluyveromyces polysporus)的醇脱氢酶KpADH同时具有还原(4-氯苯基)-(吡啶-2-基)-甲酮(CPMK)和氧化异丙醇、1,4-丁二醇的活性。通过分子对接和结构分析,发现Y127是紧靠底物的关键位点。本文通过对127位点定点饱和突变来提高催化活性和对映选择性,突变体Y127V和Y127I还原CPMK的比活力达到95.0U/mg和84.0U/mg,分别是野生型的6.5倍和5.8倍,突变体Y127L催化CPMK生成(R)-(4-氯苯基)-(吡啶-2-基)-甲醇[(R)-CPMA]的e.e.值由82%提高到99.2%。同时,127位点的突变提高了对醇类底物的氧化活性,突变体Y127I对异丙醇的比活力是野生型的1.46倍,而Y127C更青睐于对1,4-丁二醇的催化氧化,其比活力是野生型的3.00倍。分子间作用力分析表明,Y127L与底物CPMK间增加的氢键和π-π作用力稳定了底物构象,进一步提高了还原CPMK的对映选择性。本文为醇脱氢酶KpADH的分子改造和机制解析提供了指导,提高了该酶的工业应用潜力。
- 朱诚许国超戴威周婕妤倪晔
- 关键词：醇脱氢酶比活力对映选择性生物催化
- 秸秆碱预处理液脱毒及其在丁醇发酵中的应用
- 2020年
- 秸秆的碱预处理液可造成严重的环境污染。该研究基于源头控制的理念,对碱预处理液进行脱毒工艺研究并回收进行丁醇发酵研究。通过加酸去除碱预处理液中的木质素,用活性炭将去除木质素的预处理液脱毒并用于水解和发酵过程。优化获得沉淀碱溶性木质素的最佳pH 3.8;不同加量活性炭脱毒后的碱预处理液对秸秆水解的影响不明显,然而活性炭的添加量对丁醇发酵影响较大,当活性炭添加量为15 g/L时,发酵72 h达到最高丁醇质量浓度10.2 g/L。该秸秆碱预处理液脱毒工艺对利用秸秆进行无废生产生物燃料有一定参考价值。
- 董晋军马宝剑龚磊韩瑞枝许国超周婕妤倪晔
- 关键词：玉米秸秆木质素脱毒丁醇
- arcA基因提高大肠杆菌对有机溶剂的耐受性被引量：1
- 2016年
- 【目的】将来源于恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida JUCT1)的基因arc A(编码精氨酸脱亚胺酶)整合到Escherichia coli JM109(DE3)基因组中,以提高该菌对有机溶剂的耐受性。【方法】以P.putida JUCT1的基因组为模板扩增基因arc A,并与p ET-20b(+)连接后导入E.coli JM109(DE3)中,验证该基因提高E.coli JM109(DE3)对有机溶剂的耐受性。利用Red同源重组的方法将arc A整合到E.coli JM109(DE3)基因组中。【结果】E.coli JM109(DE3)/p ET-20b(+)-arc A在添加了2.0%(体积比)环己烷、0.1%(体积比)甲苯、4.0%(体积比)萘烷和0.1%(体积比)丁醇的培养基中培养8 h后,其OD660由初始的0.2分别上升到0.8、0.9、1.8和1.3。将arc A成功整合到E.coli JM109(DE3)基因组中,获得了具有较好遗传稳定性的溶剂耐受E.coli JM109(DE3)宿主菌株。【结论】外源基因arc A能提高大肠杆菌菌株的有机溶剂耐受性,为工业化应用中耐溶剂微生物菌株的构建提供了实验依据和理论基础。
- 张法韩瑞枝许国超董晋军倪晔
- 关键词：精氨酸脱亚胺酶RED同源重组有机溶剂耐受性恶臭假单胞菌大肠杆菌
