王孝花
- 作品数：7 被引量：4H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 芋螺多肽Eb1.6的制备工艺研究被引量：1
- 2013年
- 目的研究α-芋螺多肽Eb1.6的制备工艺,为其临床前实验奠定基础。方法采用Fmoc保护氨基酸,以Rink树脂为固相载体,N,N-二异丙基碳二酰亚胺(DIC)/1-羟基苯并三唑(HOBt)为缩合剂,手工固相法规模合成目标肽。线性肽折叠采用空气氧化法,将线性肽按0.2 mg/ml的浓度溶于0.1 mol/L NH4HCO3缓冲液中,室温下搅拌16～24 h。折叠结束后,加入Amberlite XAD16大孔吸附树脂富集,树脂用乙醇浸洗,旋转蒸发浓缩得折叠后粗品,然后进行反相纯化。结果 Eb1.6线性肽的粗产率为94.6%,Eb1.6折叠肽粗品的回收率为82.3%,粗品经C18反相纯化后纯度高于98.5%。结论以DIC/HOBt为缩合剂合成Eb1.6的纯度及产率均较高,Eb1.6折叠后用吸附树脂富集,乙醇浸泡再释放多肽,可实现缓冲体系及树脂的反复循环,降低了成本。
- 徐艳余硕姬泓巍董铭心王孝花吴巧玲戴秋云
- 关键词：固相合成折叠纯化
- 替韦立马一水合物的制备及新晶型结构测定被引量：1
- 2012年
- 目的:改进替韦立马的合成工艺,制备替韦立马新晶型。方法:以对三氟甲基苯甲酸甲酯为起始原料,经肼解反应制得重要中间体对三氟甲基苯甲酰肼(6);6与中间体4,4a,5,5a,6,6a-六氢-4,6-亚乙烯基-1H环丙[f]异苯并呋喃-1,3(3aH)-二酮(4)缩合得到目标化合物替韦立马粗品,以90%乙醇溶液结晶制得晶体。结果与结论:反应条件优化后,总收率提高到61%,降低了生产成本,有利于工业化生产;所得替韦立马晶体为单斜晶系,含1个结晶水。
- 董铭心李海涛王孝花毛文祥周尚民戴秋云
- 关键词：水合物晶型
- 芋螺毒素多肽Eb1.6的制备方法
- 本发明涉及一种芋螺毒素多肽Eb1.6的制备方法。本发明公开了一种制备芋螺多肽Eb1.6的方法。本发明提供的方法，包括如下步骤：1）采用缩合剂DIC/HOBt合成Eb1.6线性肽；2）折叠所述线性肽，即得到芋螺多肽Eb1....
- 戴秋云徐艳董铭心余硕刘珠果王孝花周尚民李海涛代琴
- 文献传递
- 抗HIV融合多肽CP32M的制备工艺研究被引量：1
- 2011年
- 目的:研究抗HIV融合多肽CP32M的制备工艺,为其临床前试验奠定基础。方法:采用固-液相混合策略规模合成目标肽,用离子交换色谱、反相高效液相色谱对粗肽进行纯化。结果:获得了利于提高合成及片段缩合效率的3条优选片段,CP32M粗品经DEAE离子交换色谱及C18反相纯化后纯度高于98%。结论:CP32M按3条片段(Ac-1-9-OH、Fmoc-10-21-OH、H-22-32-NH2)划分,可显著提高片段合成及缩合效率,DEAE阴离子交换色谱能除去大部分杂质,提高了第二步C18反相色谱纯化效率。
- 付超郭会芹王孝花胡洁戴秋云
- 关键词：多肽合成
- 芋螺毒素多肽Eb1.6的制备方法
- 本发明涉及一种芋螺毒素多肽Eb1.6的制备方法。本发明公开了一种制备芋螺多肽Eb1.6的方法。本发明提供的方法，包括如下步骤：1）采用缩合剂DIC/HOBt合成Eb1.6线性肽；2）折叠所述线性肽，即得到芋螺多肽Eb1....
- 戴秋云徐艳董铭心余硕刘珠果王孝花周尚民李海涛代琴
- 新型HIV-1 gp41融合抑制剂CP32M的构效关系研究被引量：1
- 2012年
- 目的研究新型融合多肽CP32M中VEWNEMT序列的长短、残基的极性及其他部位残基的极性对其抑制gp41融合活性的影响。方法在多肽CP32M的基础上,通过对前7个氨基酸序列进行截取、部分替换、全部替换及改变其他位置氨基酸残基的极性设计合成系列多肽,测定多肽抑制HIV-1融合活性。应用圆二色谱、分子排阻色谱测定多肽与N36的结合功能。结果截取、替换氨基酸后的肽抑制gp41融合的活性都不同程度降低,与N36结合形成六束螺旋的能力减弱。在CP32M中部及C端i与i+4位置引入Lys增加Glu-Lys离子对作用后,肽活性降低。用C34的C端氨基酸序列NEKDLLE及可与gp120结合的序列RINNIPWSEAM置换QIWNNMT后,多肽仍有很高活性。结论片段VEWNEMT是关键片段,其中VE及MT是关键功能氨基酸。其他片段替代该片段后仍有较强活性,也与N36形成螺旋结构,提示该片段含有共性结合区。
- 王孝花成健伟朱卫国董铭心种辉辉何玉先戴秋云
- 关键词：HIV-1多肽构效关系
- 替韦立马两种立体异构杂质的合成及鉴定
- 2013年
- 目的合成替韦立马原料药中的两种立体异构杂质(1,2),用于其质量及毒理学研究。方法通过改变环庚三烯与顺丁酸酐的缩合条件,合成了托烷酸酐异构体,然后与对三氟甲基苯甲酰肼反应形成替韦立马立体异构体。结果与结论两种杂质经核磁氢谱、质谱确证为4,4a,5,5a,6,6a-六氢-4,6-亚乙烯基-1H环丙[f]异苯并呋喃-1,3(3aH)-二酮及3aR,4S,4aS,5aR,6R,6aS-3,3a,4,4a,5,5a,6,6a-六氢-4,6-亚乙烯基-1H环丙[f]异苯并呋喃-1,3(3aH)-二酮。反应温度和反应时间对不同构象托烷酸酐中间体的含量影响较大,反应温度提高及反应时间延长均增加了托烷酸酐中间体含量,最终增加目标产品的杂质量。所得两种杂质为替韦立马原料药质量及毒理学研究奠定了基础。
- 周尚民李海涛董铭心王孝花戴秋云
