徐春
- 作品数:3 被引量:1H指数:1
- 供职机构:淮阴师范学院生命科学学院江苏省环洪泽湖生态农业生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省“青蓝工程”基金江苏省高校高新技术产业发展项目更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 利用RNA干扰技术创制高直链淀粉马铃薯新材料
- 2014年
- 直链淀粉由于其独特的理化性质,在工业上有着广泛的应用.郭志鸿[1]等利用RNA干扰技术抑制马铃薯中两类淀粉分支酶亚基基因Sbe1和Sbe2的表达,有效提高了马铃薯的直链淀粉含量.本研究利用RNA干扰技术,构建马铃薯SBEⅠ(the ndogenesis starch branching enzymeⅠ)和SBEⅡ(the endogenesis starch branching enzymeⅡ)单基因以及SBEⅠ和SBEⅡ双基因的RNA干扰双元表达质粒载体.采用农杆菌介导法将重组基因转化马铃薯品种Désirée后,得到3个转化系列.分别对转基因马铃薯植株进行PCR鉴定,对转基因淀粉表观直链淀粉含量和凝胶化特性等性质进行分析.结果表明,利用RNA干扰技术单独抑制SBEⅠ或SBEⅡ基因的表达,不能提高直链淀粉含量,甚至会导致其含量降低.而当SBEⅠ和SBEⅡ基因表达同时受到抑制时,超过50%的转基因株系直链淀粉含量高于对照.转化株系表观直链淀粉的含量最高可达到49.1%,与对照(28.5%)相比提高了20.6%.
- 朱彩云黄翠香于伟王忠亚杨金金徐盼盼徐春季勤
- 关键词:转基因马铃薯RNA干扰直链淀粉
- 高盐胁迫渗透对SBD2重组蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的影响
- 2010年
- 在基因工程的操作中,包涵体的形成是人们利用大肠杆菌表达外源蛋白质的一大难点.本研究将环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)环状糊精糖基转移酶(CGTase)的淀粉粒结合域(SBD)基因编码序列的两个拷贝通过一连接肽连接(SBD2)后,克隆到大肠杆菌表达载体pTrcHis B上,得到的pTrcHis B/SBD2质粒转化大肠杆菌Top10,研究了不同培养基、不同诱导温度和时间对SBD2蛋白表达的影响.结果表明,利用相容性溶质山梨醇和甜菜碱等,在高盐胁迫下,实现了SBD2重组蛋白质在大肠杆菌中的可溶性表达,这一结果为在体外研究SBD2蛋白的功能奠定了基础.
- 季勤张云峰罗玉明徐春黄翠香
- 关键词:相容性溶质可溶性表达
- 不同启动子对禽流感病毒H5HA基因在马铃薯体中表达的影响被引量:1
- 2012年
- 将编码禽流感病毒H5N1亚型的血凝素基因H5HA的cDNA片段分别与马铃薯GBSS I和甘薯SpoA基因启动子序列融合,通过农杆菌介导法将重组基因转入马铃薯,分别用PCR、Western(印迹杂交和斑点杂交)方法对重组基因在马铃薯中的表达情况进行了分析.并将其结果与融合CaMV35S启动子的H5HA重组基因在马铃薯体内的表达情况进行比较.分析结果表明,3个重组的H5HA基因在马铃薯薯块中均获得了表达,其表达量最高的是融合GBSS I启动子的H5HA重组基因,最低的是融合SpoA启动子的H5HA重组基因.
- 黄翠香季勤张云峰徐春窦秉德
- 关键词:转基因马铃薯启动子