陈青松
- 作品数：5 被引量：19H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市科委基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 下调IL35通过上调自噬相关蛋白表达而抑制肝细胞癌侵袭和迁移被引量：3
- 2023年
- 目的探讨白细胞介素35(interleukin 35,IL35)在肝癌中的表达及其临床意义、潜在的分子机制。方法收集手术确诊的肝细胞肝癌和癌旁组织40对。采用RT-qPCR和Western blot检测IL35在肝癌和癌旁组织中的表达,并分析IL35与各临床指标的相关性。Western blot检测IL35在肝癌细胞中的表达。慢病毒转染下调IL35。CCK-8和集落形成检测细胞增殖,Transwell实验检测侵袭和迁移,Western blot检测细胞自噬和EMT相关指标。结果IL35高表达于肝癌组织中(P<0.01);与HL7702肝细胞相比,IL35蛋白表达在Hep3B、Huh7、SMMC7721、Bel7402细胞中升高,且Hep3B表达最高(P<0.01);高表达与血管侵犯相关(P=0.0033);Transwell实验表明下调L35能有效抑制肝癌细胞侵袭和转移(P<0.01);CCK8和平板克隆实验表明,下调IL35能有效抑制肝癌细胞增殖(P<0.01);Western blot结果显示,下调IL35能促进LC3BII、Beclin1表达,抑制p62表达(P<0.01),同时促进E-cadherin表达并抑制N-cadherin、Vimentin的表达(P<0.01)。结论IL35高表达于肝细胞肝癌组织和肝癌细胞中,其表达与肝癌的血管侵犯相关;下调IL35能通过诱导自噬达到抑制肝癌细胞的侵袭和迁移的目的。
- 易言陈青松吴忠均
- 关键词：肝细胞癌自噬上皮间质转化
- IL-37通过促进巨噬细胞M2型极化在缺氧/复氧诱导的肝细胞损伤中的保护作用被引量：2
- 2017年
- 目的探讨IL-37通过促进巨噬细胞M2型极化在缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的肝细胞损伤中的保护作用及其相关分子机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测在不同极化类型的人单核巨噬细胞THP-1中IL-37 mRNA和蛋白质水平。通过慢病毒转染构建稳定过表达IL-37的细胞株,qRT-PCR检测CD206、CD86、ARG1和iNOS mRNA水平,流式细胞术检测CD163、CD86蛋白质水平。通过Transwell法将THP-1细胞与人肝细胞L02细胞共培养并构建H/R模型,CCK-8法及流式细胞术检测L02细胞存活率及凋亡率,ELISA检测细胞培养液中谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)含量,HE染色观察细胞形态变化。Western blot检测THP-1细胞中STAT6及其磷酸化水平。结果 M2型巨噬细胞中IL-37 mRNA及蛋白质水平上调。IL-37促进巨噬细胞M2型极化。IL-37诱导的M2型巨噬细胞与L02细胞共培养,在H/R状态下显著提高肝细胞存活率(P=0.015),并降低细胞凋亡率和ALT、AST水平(P<0.001),减轻细胞损伤。Western blot提示过表达IL-37的THP-1细胞中STAT6蛋白质磷酸化水平上调(P<0.01)。结论 IL-37能促进巨噬细胞M2型极化,并对H/R诱导的肝细胞损伤有保护作用,其机制可能与STAT6信号通路有关。
- 朱迪李婷婷陈青松牟童汤成泳
- 关键词：巨噬细胞肝细胞损伤
- GSK-J4通过抑制STAT3磷酸化对HepG2肝癌细胞凋亡和侵袭的影响被引量：6
- 2018年
- 目的探讨GSK-J4通过抑制组蛋白去甲基化酶含Jumonji结构域蛋白3(Jumonji domain-containing protein 3,Jmjd3)并上调H3K27me3的表达影响HepG2肝癌细胞凋亡和侵袭的分子机制。方法体外培养人正常肝细胞L02及人肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞株HepG2、SMMC7721,RT-PCR检测Jmjd3 m RNA表达,Western blot检测Jmjd3、H3K27me3蛋白表达;CCK-8法检测不同浓度GSK-J4(0、10、30、50μmol/mL)处理HepG2后增殖能力;流式细胞仪检测凋亡率;Transwell检测细胞侵袭力;Western blot检测Jmjd3、H3K27me3和凋亡相关蛋白Bcl2、Bax、Caspase3、上皮细胞间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关标记物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)以及p-STAT3、STAT3蛋白表达。结果与L02比,Jmjd3高表达,H3K27me3低表达于HepG2、SMMC7721肝癌细胞株(P<0.05);GSK-J4抑制HepG2增殖(P<0.05);GSK-J4处理组细胞凋亡率明显提高,细胞侵袭能力减弱(P<0.05);GSK-J4处理HepG2后Jmjd3水平降低,H3K27me3水平增高,Bcl2水平降低,Bax、Caspase3水平增高,E-cadherin表达增高,Vimentin水平降低(P<0.05);p-STAT3表达下调(P<0.01)。结论 GSK-J4通过抑制Jmjd3并上调H3K27me3表达而诱导HepG2发生凋亡并减弱侵袭,其可能与抑制EMT形成和STAT3的磷酸化有关。
- 陈青松万磊周壮周翔宇郑道峰吴忠均
- 关键词：HEPG2凋亡STAT3
- 丹酚酸B通过调控SIRT1/NF-κB/p53通路减轻缺氧/复氧诱导的大鼠肝细胞损伤被引量：8
- 2018年
- 目的探究丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)减轻缺氧/复氧(H/R)诱导的大鼠肝细胞损伤及潜在的分子机制。方法体外培养BRL-3A大鼠肝细胞株,制备BRL-3A的H/R模型,予以Sal B干预。CCK-8检测细胞活力;微板法测转氨酶含量;ELISA测炎性因子的含量;流式细胞术测细胞凋亡水平;Western blot和实时荧光定量PCR(q PCR)检测SIRT1、NF-κB p65、p53、Bax、Bcl-2蛋白及mRNA表达水平。结果 H/R诱导的大鼠肝细胞活力下降;细胞上清液中ALT、AST、TNF-α、IL-1β含量明显增多;细胞凋亡率明显升高;SIRT1和Bcl-2在蛋白及mRNA水平的表达下调,而NF-κB p65、p53和Bax在蛋白及mRNA水平的表达上调。在Sal B预处理后,细胞活力升高;细胞液中ALT、AST、TNF-α及IL-β的含量下降;细胞凋亡率降低;SIRT1和Bcl-2在蛋白水平及mRNA水平的表达升高,NF-κB p65、p53和Bax在蛋白水平及mRNA水平的表达降低。结论丹酚酸B可有效减轻H/R诱导的大鼠肝细胞损伤,其机制可能与SIRT1/NF-κB/p53通路有关系。
- 万磊陈青松周壮周翔宇郑道峰吴忠均
- 关键词：丹酚酸BP65
- GSKJ4和IL-37通过抑制Jmjd3减轻巨噬细胞在缺血再灌注损伤中的作用及机制研究
- 目的：探讨GSK-J4及IL-37通过抑制Jmjd3减轻肝脏缺血再灌注损伤的作用及机制，从表观遗传学的角度阐述其在减轻肝脏缺血再灌注损伤中可能性。
- 陈青松周壮万磊朱迪李婷婷郑道峰吴忠均
