李新刚
- 作品数：18 被引量：78H指数：6
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 姜黄素诱导髓系白血病细胞凋亡的分子途径被引量：8
- 2006年
- 目的研究姜黄素诱导白血病细胞系NB4、K562、THP-1凋亡的分子途径。方法培养上述3种细胞系,用不同浓度的姜黄素(25,12.5,6.25,3.125,0μmol/L)作用24 h和25μmol/L姜黄素作用不同时间(0,12,24,48 h),流式细胞仪测定细胞凋亡率及Fas抗原(CD95)表达,Western blot测定凋亡蛋白Caspase-8、Caspase-9的表达变化。结果①姜黄素以时间和浓度依赖的方式诱导白血病细胞系NB4、K562、THP-1凋亡,25μmol/L姜黄素作用48 h凋亡细胞超过50%。②25μmol/L姜黄素作用24 h后Fas抗原表达明显升高(P<0.01)。③25μmol/L姜黄素作用24 h后凋亡蛋白Caspase-8、Caspase-9的表达明显增高(P<0.01)。结论姜黄素诱导白血病细胞凋亡涉及死亡受体参与的外源性途径和线粒体参与的内源性凋亡途径。
- 薛克营李新刚陈燕
- 关键词：姜黄素细胞凋亡
- 姜黄素调节B淋巴瘤细胞p300和HDAC1的研究被引量：4
- 2006年
- p300是一种具有组蛋白乙酰化酶活性的转录辅助因子,HDAC1是一种组蛋白去乙酰化酶。本研究查明姜黄素对B-NHL细胞株Raji细胞增殖的影响,并探讨这种影响与p300以及HDAC1转录调节表达的关系。以不同浓度(6.25-50μmol/L)的姜黄素作用于体外培养的Raji细胞,用MTT法检测细胞生长抑制率,Annexin-V-FITC/PI双标流式细胞术检测细胞的凋亡率和应用RT-PCR和Westernblot法检测Raji细胞中HDAC1和p300的mRNA表达和蛋白含量的变化。结果表明:姜黄素对Raji细胞抑制作用呈明显的时效和量效关系。24小时的IC50为25μmo/L;姜黄素能够诱导Raji细胞凋亡,凋亡率为14.38%-61.18%,并呈浓度依赖性。姜黄素明显抑制HDAC1和p300的活性和表达。在IC50浓度时,随着时间的延长,其p300和HDAC1mRNA表达和蛋白含量逐渐降低,呈时间依赖性,与对照组相比有显著性(P<0.05)。结论:姜黄素对B细胞淋巴瘤细胞系Raji细胞具有抗肿瘤细胞的增殖作用,并促进其凋亡。姜黄素能够抑制转录共激活因子p300及组蛋白去乙酰化酶HDAC1活性和表达,可能是其作用机制之一。
- 吴青陈燕李新刚唐元艳
- 关键词：姜黄素B淋巴瘤RAJI细胞P300HDAC1
- 姜黄素对人淋巴瘤Raji细胞组蛋白H3乙酰化作用的影响被引量：9
- 2006年
- 背景与目的:表观遗传改变是肿瘤发生的一个重要原因,具有表观遗传修饰作用的甲基化转移酶抑制剂和去乙酰化酶抑制剂可以抑制肿瘤增殖诱导凋亡。本研究探讨姜黄素对Raji细胞组蛋白H3的乙酰化作用和细胞周期素依赖性激酶抑制剂p21WAF1/CIP1基因表达的影响。方法:用25μmol/L姜黄素作用Raji细胞不同时间,Westernblot分析乙酰化组蛋白H3和p21WAF1/CIP1变化;RT-PCR检测p21WAF1/CIP1基因表达;染色质免疫沉淀分析p21WAF1/CIP1的启动子基因位点组蛋白H3乙酰化水平;流式细胞术检测细胞周期变化。结果:姜黄素提高p21WAF1/CIP1的启动子基因位点组蛋白H3乙酰化水平1.9倍;使p21WAF1/CIP1mRNA合成增加和蛋白表达上调,在24h时分别增加了4.2倍和5.1倍;24h阻滞细胞在G2/M期,36h阻滞在G0/G1期。结论:姜黄素通过表观遗传修饰作用,调节p21WAF1/CIP1启动子基因位点组蛋白H3乙酰化水平,促进p21WAF1/CIP1基因转录,阻滞Raji细胞周期进程。
- 李新刚陈燕吴青孙春艳
- 关键词：姜黄素表观遗传修饰P21^WAF1/CIP1淋巴瘤RAJI细胞组蛋白H3
- 血管内皮细胞生长因子内-自分泌环在恶性血液病发病中的意义被引量：3
- 2003年
- 血管内皮细胞生长因子(vascula endothelial growth factors,VEGFs)是一组具有重要生物学作用的血管生成肽,调节新生血管生成、造血干细胞发育、细胞外基质重建和炎症因子释放等。最近的研究发现,某些恶性血液病细胞不仅可以分泌VEGF,而且还选择性地表达功能性的血管内皮细胞生长因子受体(VEGF receptors VEGFs),形成一个自身的内分泌环,促进这些恶性血液病细胞的存活、增殖和浸润。
- 李新刚
- 关键词：血管内皮细胞生长因子恶性血液病自分泌环造血干细胞
- TSA抑制NB4细胞去乙酰化酶活性并促进细胞周期素激酶抑制剂表达被引量：7
- 2005年
- 目的 研究曲古菌素A(Trichostatin A，TSA)对NB4细胞组蛋白去乙酰化酶HDAC1的作用及细胞周期依赖激酶抑制剂P21WAF1/CIP1的表达，探讨TSA抗自血病的作用机制。方法 培养人的急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4，应用TSA在不同浓度和不同时间点处理细胞，提取细胞的总蛋白和mRNA，用Western blot蛋白质印迹技术检测HDAC1和P21WAF1/CIP1蛋白表达，并用RT-PCR技术同时俭测P21WAF1/CIP1 mRNA的表达水平、结果 ①TSA明显抑制HDAC1的活性和表达，在IC90浓度时作用4h HDAC1已经降低，持续48h；在较低浓度(37.5nmol·L^-1)时就对HDAC1有明显的抑制作用，但在75～300nmol·L^-1时HDAC1降低水平未见明显区别；②TSA明显促进P21WAF1/CIP1蛋白和mRNA的表达，在8h时mRNA已增高，12h后可处到蛋白增加，在浓度大于150nmol·L^-1时呈明显时间和剂量依赖性。结论 TSA明显抑制HDAC1活性和表达，促进细胞周期依赖性激酶抑制剂P21 WAF1／CIP1蛋白和mRNA水平升高，有明显的抗白血病作用。抑制HDAcl活性和促进P21^WAF1/CIP1。增加可能是TSA抗白血病的机制之一。
- 李新刚陈燕吴青
- 关键词：曲古菌素A组蛋白去乙酰化酶NB4细胞
- 成人急性淋巴细胞白血病HSP70蛋白及mRNA的表达研究被引量：2
- 2005年
- 目的研究热休克蛋白70(HSP70)在成人急性淋巴细胞白血病中的表达。方法RT-PCR法和Westernblot法检测急性淋巴细胞白血病化疗前、化疗后及正常人HSP70mRNA及HSP70蛋白的表达。结果成人急性淋巴细胞白血病化疗前HSP70mRNA及HSP70的蛋白表达明显低于正常人(P<0.05),化疗后明显高于正常人(P<0.05)。结论化疗后能明显提高急性淋巴细胞白血病患者HSP70基因转录和蛋白的表达,而对癌细胞则起保护作用。
- 吴青陈燕李新刚
- 关键词：成人急性淋巴细胞白血病热休克蛋白70蛋白印迹RT-PCR
- hGCN5在Burkkit淋巴瘤细胞株Daudi中的表达及TSA对细胞增殖凋亡的影响被引量：1
- 2005年
- 目的:研究hGCN5(humangeneralcontrolofaminoacidsynthesisprotein5)在Burkkit淋巴瘤细胞株Dau-di中的表达及曲古柳菌素A(TSA)对细胞增殖、凋亡的影响,探讨其抗肿瘤的分子机制。方法:采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率,采用免疫细胞化学法和Westernblot观察Daudi细胞hGCN5蛋白的表达。结果:TSA可明显抑制Daudi细胞增殖;TSA(50、100μg/L)使细胞积聚于G0/G1期;TSA(200μg/L)则使细胞周期受抑于S期,而对G2/M期的作用不明显;TSA(200、400μg/L)处理24h可以诱导细胞凋亡;免疫细胞化学和Westernblot结果均显示处理组hGCN5的吸光度比未处理组明显增加(P<0.05)。结论:TSA通过上调HATs家族成员中hGCN5的表达,实现对Daudi细胞的抗增殖作用。
- 刘红利陈燕李新刚吴青谷俊侠
- 关键词：TSA淋巴瘤DAUDI
- 药物与白血病被引量：9
- 2003年
- 近年来发现 ,抗肿瘤药物和非抗肿瘤药物 ,如烷化剂、拓扑异构酶Ⅱ抑制剂 ,及氯霉素和卡马西平等 ,可以引起治疗相关性白血病。这些治疗相关性白血病在细胞遗传学及细胞分子生物学方面表现不完全相同 ,各有特点。烷化剂治疗后常伴有第 5和第 7号染色体缺失和部分缺失( 5 /5q , 7/7q ) ;拓扑异构酶Ⅱ抑制剂治疗者常伴有基因重排或移位 ,如 11q2 3 (MLL基因 )异常 ,2 1q2 3 (AML1基因 )移位和t(15 ;17) ;非抗肿瘤药物引起白血病少见。药物治疗相关性白血病与药物作用机制、药物累积剂量和初发疾病有直接关系 ,多数患者治疗再缓解率低 ,预后不良。
- 陈燕李新刚
- 关键词：治疗相关性白血病烷化剂染色体缺失
- 干扰素-α联合姜黄素对B-NHL淋巴瘤Raji细胞的增生抑制作用被引量：1
- 2006年
- 背景与目的:姜黄素(curcumin)是中药姜黄的主要成分,其选择性的抑制肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡。干扰素-α是目前用于临床治疗最重要的细胞因子之一。本研究旨在探讨干扰素-α联合姜黄素对B-NHL淋巴瘤Raji细胞的诱导凋亡作用及其作用机制。方法:以浓度2000u/L干扰素-α分别与6.25、12.5、25μmol/L浓度的姜黄素作用于体外培养的Raji细胞,观察细胞生长状态变化。MTT法检测细胞生长的抑制率,应用流式细胞仪法观察细胞凋亡,Western blot法检测24h,姜黄素(IC5025μmol/L)以及联合干扰素-α(2000u/L)对caspase6、caspase8、caspase9蛋白的影响。结果:干扰素-α与姜黄素联合应用可显著抑制Raji细胞的生长,诱导细胞发生凋亡,两者具有协同效应。凋亡蛋白caspase6、caspase8、caspase9表达显著增高,其作用呈现出明显的量效与时效关系。结论:干扰素-α与姜黄素联合应用对B-NHL淋巴瘤Raji细胞具有明显的增生抑制作用;促进凋亡蛋白的表达及诱导细胞凋亡,可能是其重要作用机制之一。
- 吴青陈燕李新刚
- 关键词：干扰素-Α姜黄素CASPASE8CASPASE9
- 姜黄素和干扰素γ抑制慢性髓系白血病STAT5基因表达的研究
- 2006年
- 目的探讨姜黄素和干扰素γ(IFN-γ)对慢性髓系白血病(CML)K562细胞STAT5基因表达的抑制作用及其作用机制。方法运用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活性。运用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞STAT5 mRNA的变化。运用激光共聚焦显微镜和免疫印迹法检测STAT5蛋白的表达。结果①姜黄素或IFN-γ作用K562细胞24 h,K562细胞增殖活性明显受到抑制,STAT5 mRNA和STAT5蛋白表达降低。②姜黄素与IFN-γ联合干预K562细胞24 h,细胞增殖活性、STAT5 mRNA和蛋白的表达均显著低于姜黄素组(均P<0.01)。结论姜黄素和IFN-γ联用能明显抑制慢性髓系白血病细胞增殖以及STAT5基因表达。
- 陈伟红陈燕任澎谷俊侠薛克营李新刚吴青刘红利
- 关键词：姜黄素干扰素Γ慢性髓系白血病基因STAT5
