宋焕景
- 作品数：4 被引量：7H指数：1
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- 肺炎支原体P1重组蛋白的提取纯化及其在血清学检测中的初步应用
- 肺炎支原体P1重组蛋白的提取纯化及其在血清学检测中的初步应用
前言
肺炎支原体/(Mycoplasma pneumoniae，Mp/)不仅可以引起肺炎、哮喘等呼吸系统疾病，还可导致多种...
- 宋焕景
- 关键词：肺炎支原体
- 文献传递
- 肺炎支原体重组蛋白抗原的初步鉴定
- 2005年
- 克隆并表达肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)P1黏附蛋白D-2区基因片段,进而对重组蛋白的抗原特异性进行鉴定.应用PCR技术获取目的基因片段,并构建含有目的基因片段的重组质粒,用重组质粒酶切图谱法、PCR扩增及核苷酸测序方法鉴定重组质粒.而后将其转入大肠杆菌BL21菌株,用IPTG诱导目的基因表达,用SDS-PAGE分析重组蛋白的相对分子量,免疫印迹实验鉴定其免疫反应性,并用ELISA实验测定重组蛋白抗原的特异性.结果重组质粒中的p1基因片段经测序后,与GenBank中p1基因核苷酸序列比较,其同源性为99.66%～100%;经SDS-PAGE分析,重组蛋白的相对分子量约为 59 ku;免疫印迹实验和ELISA实验证实,Mp免疫血清和Mp感染患者血清都能与重组蛋白发生特异反应.研究中的含P1黏附因子D-2区基因的重组质粒已成功构建,其表达的重组蛋白具有特异的免疫反应性,初步ELISA实验证实,本研究获得的重组蛋白可用于临床标本检测.
- 李保强赵芝娜宋焕景董占双刘忠顺王桂珍
- 关键词：肺炎支原体重组蛋白
- 肺炎支原体P1重组蛋白的提取纯化及应用研究被引量：6
- 2007年
- 提取纯化肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)P1重组蛋白,建立酶联免疫吸附实验(ELISA)的方法,协助临床肺炎支原体感染的诊断。以GST融合蛋白层析柱提取、纯化Mp P1重组蛋白做抗原,以全肺炎支原体菌体成分做抗原对照,建立间接ELISA实验方法,检测40份正常献血者血清标本和51份疑似MP感染临床血清标本的IgG抗体。重组蛋白经SDS-PAGE可见诱导表达的样品在分子量大约59 ku处有明显条带,经Western blotting可与肺炎支原体免疫血清发生反应。ELISA实验检测51份临床标本,由P1重组蛋白抗原检测阳性31份,阳性率为60.78%。Mp检测阳性20份,阳性率为39.22%。实验精确度检测阳性混合血清的变异系数(CV值)为5.40%,阴性混合血清变异系数为1.10%。用Mp P1重组蛋白抗原建立的ELISA检测方法,其敏感性高于全肺炎支原体抗原,可用于临床肺炎支原体感染的诊断。
- 宋焕景王桂珍董占双刘忠顺吉兆华周吉海
- 关键词：肺炎支原体重组蛋白
- 肺炎支原体重组蛋白抗原与膜蛋白抗原诊断试剂在临床应用中的比较被引量：1
- 2009年
- 目的以肺炎支原体(Mp)重组蛋白做包被抗原检测临床呼吸道感染患儿血清标本,验证重组蛋白抗原的诊断价值。方法利用Mp重组蛋白抗原包被酶标板,ELISA法检测临床疑似Mp感染患儿的血清标本,同时用Mp膜抗原被动凝集试验平行检测,并对比分析两种方法的检测结果。结果重组蛋白抗原ELISA检测Mp抗体的阳性率为49.00%(98/200),膜抗原被动凝集试验Mp抗体的阳性率为63.50%(127/200)。两种检测方法的总符合率为70.50%。阳性符合率为58.45%。结论Mp重组蛋白抗原ELISA检测肺炎支原体感染有诊断价值,其特异性优于膜抗原被动凝集试验。
- 赵芝娜李保强宋焕景宋娟王桂珍
- 关键词：肺炎支原体膜蛋白抗原ELISA
